变异菌株和野生型菌株纤维素酶特性的比较

更新于 2026年10月10日 版权声明
3.变异菌株和野生型菌株纤维素酶特性的比较

分别测定了由四株菌制成的固体曲的酶液中纤维素酶反应最适条件。图3和图4是AS3.3002菌株的CMC糖化力和滤纸糖化力的pH曲线和温度曲线。其余三株菌的酶反应pH曲线的温度曲线与此完全一样,唯在活力上,总是变异菌株的显著高于野生菌株。

1)CMC糖化力

几株菌的纤维素酶反应最适pH都是4.4(50℃反应),但最适pH与反应温度有关,如N2-78的纤维素酶在30℃时最适pH为5.0,40℃时为4.8,50℃时为4.4,60~75℃时为4.0~4.4。用CMC糖化力测定的纤维素酶耐热性较高,从30℃开始,随着温度升高,糖化力迅速增加,最适温度均为60℃,70℃以上酶活力显著下降。这种酶的耐热性又与反应pH有关,即在不适合的pH条件下,酶易因温度升高而失活,如N2-78纤维素酶的CMC糖化力在pH 2或7时,如温度在40℃以上,便开始降低;pH 3或6时,温度50℃以上,活力开始降低,而在较适宜的pH 4与5之间时,温度60℃以上,酶活力才开始降低。

表3 四株菌的液体曲(摇瓶)酶活力比较

图示

*培养条件:见正文。
**符号说明见表2。右上角的“+”或“-”号是表示同一等级中较强或较弱的。

表4 四株菌的纤维素酶粗酶制剂酶活力比较

图示

*粗酶制剂指丙酮粉。CMC液化力。滤纸活力、棉花糖和可溶性蛋白测定用0.5%浓度酶制剂;果胶酶、半纤维素酶、蛋白酶用1%浓度酶制剂测定。丙酮粉得率(对干曲)为5%左右。
**说明见表2。

表5 变异株EA3-867和N2-78与野生型菌株AS3.3002和木-3的各种酶制剂活力比较

图示

*“-”代表活力降低的倍数。

表6 EA3-867和N2-78纤维素酶制剂与酶制剂Onozuka R-10的活力比较

图示

注:以上测定除滤纸糖化力和棉花糖化力是用0.1%浓度酶制剂外,其余都是用1%浓度。CMC糖化力用B法,滤纸糖化力用B法(静止法)。

图示

图3 AS 3.3002菌株纤维素酶CMC和滤纸糖化活力的pH曲线

注:○——○滤纸糖化活力;●——●CMC糖化活力

图示

图4 AS 3.300 2菌株纤维素酶CMC和滤纸糖化活力的温度曲线

注:○——○滤纸糖化活力;●——●CMC糖化活力

2)滤纸糖化力(A法)(https://www.daowen.com)

四株菌株的纤维素酶的最适pH均为4.(850℃反应),最适温度均为50℃。

3)滤纸崩溃法(静止)

四株菌株的纤维素酶的最适pH均为4.(850℃反应),最适温度均为60℃。

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