变异株和野生型菌株纤维素酶凝胶电泳的比较

对四株菌株洗涤菌丝体用槐糖诱导形成的纤维素酶胞外酶和胞内酶的聚丙烯酰胺凝胶电泳（2小时）进行了比较，结果如图4和图5所示。变异株EA3-867和N2-78胞外酶的蛋白带，分别与野生型菌株1096和木-3类似，而胞内蛋白带的数目明显减少（从6条减少至3条），可能是变异株中非纤维素酶的蛋白带减少了。凝胶段酶活的切割测定，证明胞外酶二条颜色深的蛋白带位置具有纤维素酶活性（棉花糖和Cx）。图7是四株菌株胞外纤维素酶电泳4小时进一步分离的凝胶电泳图。可以看出，变异株和野生型菌株胞外酶均清楚地由四条区带组成（Ⅰ～Ⅳ），总的蛋白带数在洗涤菌丝体用槐糖诱导较为单纯的条件下，远较液体培养或固体培养时（如以稻草粉或纤维素粉为碳源）为少。变异株，尤其是N2-78的区带Ⅲ，其次是Ⅳ明显加深。四株菌株胞外酶的凝胶电泳扫描图（见图1）也证实变异株和野生型菌株的蛋白峰一样，仅变异株中Ⅲ，其次是Ⅳ和Ⅰ高于野生型菌株。凝胶段切割后酶活测定，进一步证明峰Ⅲ主要代表C1酶活性（棉花糖表示），Ⅳ和Ⅰ主要具有Cx酶活性，区带Ⅱ由三条带组成，除了Ⅱ-3具有少量C1酶活性外，其余均测不到纤维素酶活性（见图2）。从图7和图2中可以看到槐糖诱导的胞外蛋白很纯，绝大部分是纤素维酶。(https://www.daowen.com)