关于应用激素治疗结核性胸膜炎

关于皮质醇激素治疗结核性胸膜炎的临床研究陆续在各个研究中心正式启动，由于我们大家都是用心去做，虽然困难不小，相信整个项目终将会按照计划推进和完成。

为了配合主要的研究工作内容，我们自然也会结合本科室的工作同步开展一些相关的免疫学研究工作。也就是说，本中心所募集的患者除了收集临床资料之外，还会留取胸液和静脉血标本观察激素对于结核性胸膜炎患者免疫学尤其是T细胞亚群的影响。这部分工作将与我们既有的其他免疫学研究工作交叉进行。该部分研究不需要太多的病人例数，每组25例左右即达到要求。

从后述的研究计划可以看出，研究内容没有立竿见影的结果，将是一项长期艰巨的工作，需要很多人付出大量的时间和精力，将至少会有三届研究生直接参与该项工作。从进度来看，因为要到2014年揭盲之后才知道每一例患者接受的是激素还是安慰剂治疗，所以在那以前不可能发表相关的论文。另一方面，研究生的学位论文将从其他研究资料抽出部分结果撰写完成。

这是一项科研设计严谨的基础应用研究，并能够明确回答一些重要的问题；对于这些问题不但临床医生希望知道，甚至基础研究人员也很关心。我们相信，系列研究论文应该可以发表在很好的专业期刊上。（2010年5月4日）

附：研究计划(https://www.daowen.com)

（1）治疗和标本收集：结核性胸膜炎患者随机分配到激素组和安慰剂对照组，开始四联抗结核治疗。激素组在抗结核治疗的同时加用泼尼松，剂量为：第1、2周30 mg/d，第3周20 mg/d，第4周10 mg/d，第5周停药。安慰剂的使用时间和药物片数相同。治疗前后同步收集胸水和静脉血，治疗后第4、7、14、28天同步收集胸液和静脉血标本。

（2）标本收集和处理：患者住院后24小时之内，于任何治疗前胸腔穿刺收集胸液标本，置于肝素处理过的试管中送检，试管则置于冰浴中。与此同时，抽取静脉血用于分离血清。胸液离心收集上清液，与血清冻存待测细胞因子和趋化因子的浓度。胸液细胞则用于做有核细胞计数和分类，以及T细胞免疫学相关研究。

（3）流式细胞仪检测：将106个新分离的胸液细胞悬于含有牛血清蛋白和叠氮钠的Hank's缓冲溶液中，24小时内以FACStar Plus流式细胞仪检测下列分子的表达。表面分子：CD3、CD4、CD8、CD25、CD39、CD45RA、CD45RO、CD127等；细胞内分子：IL-4、IL-9、IL-17、IL-22、IL-23、IFN-γ、FOXP3等。

（4）可溶性细胞因子和趋化因子测定：细胞因子（IL-1β、IL-4、IL-5、IL-9、IL-17、IL-22、IL-33等）及趋化因子应用市售试剂盒进行检测，方法按照产品所附说明书进行操作。所有标本均双管检测，取平均值为结果。

（5）外周血对结核杆菌抗原的反应：应用IFN-γELISPOT分析测定T细胞对r ESAT-6、PPD及ESAT-6抗原反应后产生IFN-γ的能力。