寄生虫病的免疫学诊断

六、寄生虫病的免疫学诊断

由于寄生虫的抗原组成特点,对寄生虫病的免疫学诊断(血清学诊断)不如对传染病的诊断应用广泛。一般免疫学诊断主要用于原虫病和组织内寄生的蠕虫病,而对于肠道蠕虫病还多以病原学诊断为主。这主要是由于原虫为单细胞寄生虫,其抗原组成较简单,而蠕虫的抗原组成较复杂,虫种间的抗原常有交叉反应。另外,对一些蠕虫病的病原学诊断较免疫学诊断方法操作简便,结果更直观。

(一)诊断用抗原的种类

用于寄生虫病免疫学诊断的抗原主要包括:①整体抗原,如血吸虫虫卵、尾蚴和微丝蚴等抗原,用于环卵沉淀反应、固相抗原免疫酶测定等;②排泄物-分泌物抗原(ES抗原),各种寄生虫都有这类抗原,但只有那些可以进行体外培养的虫体才可以提取ES抗原,一般认为,ES抗原的免疫原性和反应原性均强于其他类型的抗原;③粗抗原,它是将收集的虫体进行冻融、研磨或超声处理后而制备的抗原,多数寄生虫免疫学诊断抗原都是以这种方法制备的粗抗原,因而其敏感性和特异性并不是很理想;④纯化抗原,它是以各种纯化技术,如凝胶过滤、离子交换层析及亲和层析等方法,将粗制的抗原进一步分离、精制;以这种抗原作为诊断原,其敏感性和特异性均较其他抗原有很大的提高;其中最有效的方法是以特异性单克隆抗体进行亲和层析提取;⑤基因重组抗原,在获得特异性抗原基因的基础上,以基因工程的方法大量制备特异性寄生虫抗原,这是解决寄生虫特异性抗原制备问题的有效途径之一。如前所述,很多寄生虫的特异性抗原基因的体外表达方法已经建立,今后基因工程抗原在诊断方面的应用将会越来越广泛。

(二)常用的几种免疫学诊断方法

几乎所有的免疫学诊断方法都在寄生虫病的诊断中进行过试验,但由于寄生虫本身的特点,不同的免疫学诊断方法的敏感性和特异性不尽相同。现将几种主要的免疫学方法在寄生虫病诊断上的应用做介绍。(https://www.daowen.com)

1.酶联免疫吸附试验 该方法的应用最广泛,几乎适用于所有的寄生虫病的诊断,其敏感性和特异性也较高。可测定抗体,也可测定循环抗原,粪便样品、脓液和体液中的抗原。

2.间接免疫荧光试验 该方法主要用于血液原虫病(如巴贝斯虫病、疟疾、锥虫病)、弓形虫病及组织内寄生虫病的诊断,是世界粮农组织(FAO)指定检测牛巴贝斯虫的标准方法。该方法可检测血清中的抗体,也可检测组织内的寄生虫。

3.补体结合试验 该方法也主要用于血液原虫病的诊断,是FAO指定检测马巴贝斯虫的标准方法。

4.间接血凝试验 该方法多用于原虫病的诊断和流行病调查,但其敏感性和特异性不如上述三种方法,目前已不常用。

其他常用技术还包括乳胶凝集试验、免疫印迹技术和免疫层析技术等。最后需要指出的是,多数免疫学诊断方法既可以用特异性抗体检测虫体抗原——循环抗原(CA),也可以用特异性抗原检测体内的特异性抗体。但对于慢性感染或隐性带虫者,检测CA可能更有意义。因为体内有虫体寄生,必有CA存在。检测CA不但可以判定感染与否,还可以确定感染强度,是否为当前感染,以及判定疗效等。