免疫性不孕症的诊断
美国生殖协会（ASRM）评价不孕的标准包括精液分析、性交后试验、排卵监测、输卵管检查，必要时行腹腔镜检查。经宫腔镜和（或）腹腔镜检查证实输卵管通畅，排卵功能（基础体温、宫颈黏液改变、血清LH峰或黄体中期孕酮升高）正常，精液检查未发现异常者，可诊断为原因不明性不孕症。
对于免疫性不育症的诊断，需要以病史、体检、实验室检查等综合分析判断，其中AsAb的测定是诊断的关键。本节重点介绍有关的实验室检查。
（一）诊断的间接指标
下列指标可作为免疫性不育的参考指标。
1.精液常规分析 精子凝集抗体阳性患者，1/3精子计数和活动力正常，1/3精子计数减少和活动力降低，余1/3缺乏精子。有些患者可见到精子的自发性凝集现象。
2.精子-宫颈黏液相互作用试验
（1）体内试验（性交后试验，PCT）：本试验用于测定宫颈黏液中的活动精子数，借以评价性交后若干小时内精子是否存在及功能表现，从而反应精子和宫颈黏液的异常情况。
（2）体外试验：
①精子毛细管穿透试验：测定精子穿透毛细管中宫颈黏液的能力，AsAb存在时，影响精子穿透能力。
②玻片试验：将1滴宫颈黏液滴在玻片上，盖上盖玻片，在盖玻片边缘滴精液，检查精子能否穿透进入宫颈黏液中。
③精子宫颈黏液接触试验：取1滴排卵前期宫颈黏液放在玻片上，加1滴精液，加盖玻片使之混匀，室温置30 min后观察快速颤动而不前进精子的百分率，大于50%时为阳性。如夫妇间精液和宫颈黏液为阳性，则可用供者精液或供者宫颈黏液做交叉试验，以确定AsAb是存于精液还存在于宫颈黏液中。此类AsAb主要为IgA。
3.人精子穿透去透明带金黄地鼠卵试验（SPA）SPA可检测人精子有无受精能力，AsAb可影响精子与卵子的相互作用，因此免疫性不育者可出现SPA异常。
（二）诊断的直接指标
1.抗精子抗体检测 AsAb可存在于血清、精浆、宫颈黏液和精子表面。血清内的AsAb主要是IgG和IgM，精浆内主要是IgG和IgA，少数患者有IgE，而精子表面的AsAb主要是吸附的精浆抗体。
（1）凝集反应：可检测血清和精浆内的AsAb。
①直接凝集反应：有明胶凝集试验（GAT）、试验-玻片凝集试验（TSAT）、组织配型板凝集试验（TAT）等方法。
②间接凝集反应：近几年发展较快的试验，包括被动血凝试验+Coombs试验、混合抗球蛋白反应（MAR）、免疫珠试验（IBT）和免疫洗选法（panning）。(https://www.daowen.com)
（2）补体依赖试验：精子抗原与AsAb相互作用，激活补体系统，损伤精子细胞膜通透性和完整性，导致精子活动力降低或丧失（可用制动试验测定）和被某些染料着色（用细胞毒试验测定）。
（3）免疫荧光法：常用间接免疫荧光法。将待检标本加至固定有精子抗原的玻片上，如果待检标本含有抗精子抗体，则可发生反应；再加标记荧光素的抗体，然后镜检荧光强度及分布。
（4）酶标记免疫法：酶联免疫吸附试验（ELISA）可测定血清或精浆的AsAb。固相酶染色法的基本原理同ELISA，但还可观察精子的着色部位。
（5）放射免疫分析（RIA）：可用固相放射免疫结合测定法（RIBA）和125I标记兔抗人球蛋白的双抗体法检测AsAb含量。
（6）免疫印迹法（immunoblotting）：采用该法测定抗精子多肽抗体。先用SDS-PAGE提取7种精子多肽，将多肽转移至醋酸纤维膜，滴加不同稀释的待测血清，然后浸入碱性磷酸酶标记的兔抗人IgG，取出后再浸入乙胺醇对硝基苯磷酸盐溶液，最后取出醋酸纤维膜，用扫描仪测定并计算蛋白含量，由此推算抗精子多肽抗体的量。此法可检出用精子凝集试验无法测出的抗精子的多肽抗体。
2.细胞免疫功能检测
（1）白细胞移动抑制试验：被精子抗原致敏的淋巴细胞，在被精子抗原激活时，可释放出可溶性的淋巴因子，使白细胞移动速度减慢。该法可作为测定精子抗原的细胞免疫方法，是免疫不育的辅助诊断手段。
（2）白细胞黏附抑制试验：正常人外周血液中的白细胞，在一定条件下，能黏附于清洁的玻璃表面。在精子抗原作用后，被致敏淋巴细胞的黏附能力明显下降，出现黏附抑制现象。免疫性不育症患者黏附抑制指数升高。
（3）淋巴细胞转化试验：一般采用3H-TdR掺入法，该法阳性率与凝集AsAb阳性率明显相关，可检测T和B细胞功能，对诊断免疫性不育帮助较大。
（4）外周血白细胞促凝血活性测定：其作用原理是致敏淋巴细胞再次与抗原（如精子、精浆）接触时可被激活，产生一种可溶性介质，此介质能诱导单核细胞产生结合在细胞膜上的促凝血活性因子，从而引起血凝固加速。但该法结果与AsAb结果并不完全一致。
（5）花环试验：通过采用T花环试验和活性花环试验分别测定T细胞和活性T细胞数目，发现免疫性不育者两者均明显下降。
（6）精液巨噬细胞测定：精液室温液化后，校正精子密度为50×106/mL，取此混悬液5 μL，滴片，空气中干燥，丙酮固定10 min，以鼠抗人巨噬细胞单抗CD68S-P法测定精液巨噬细胞。
3.精浆免疫抑制活性物质的检测
（1）抗补体法：该法检出的精浆免疫抑制物质的正常值为（430±60）U/mL，不同实验室可以建立自己的正常参考值。
（2）单向免疫扩散法：该法检出的精浆免疫抑制物质的正常值为（3.0±0.3）g/L。
（3）间接免疫荧光法：精浆免疫抑制物质位于头部者占69.7%、颈部者占21.2%、尾部者占9.1%。
（4）固相酶联免疫测定法：正常人精浆免疫抑制因子-DF2的平均值为（1.32±0.72）mg/mL。