一、霍乱弧菌

一、霍乱弧菌

霍乱弧菌（V.cholera）是人类霍乱的病原体。霍乱是一种古老且流行广泛的烈性传染病。曾在世界上引起多次大流行，主要表现为剧烈的呕吐、腹泻、脱水，死亡率甚高，属于国际检疫传染病。

（一）生物学性状

1.形态与染色　新分离出的霍乱弧菌为革兰阴性菌，菌体弯曲呈弧状或逗点状，菌体一端有单根鞭毛，运动活泼，有菌毛，无荚膜，不形成芽胞。经人工培养后，易失去弧形而呈杆状。取霍乱患者米泔水样粪便做活菌悬滴观察，可见细菌运动极为活泼，呈流星穿梭样运动。

2.培养特性　营养要求不高，在pH 8.8～9.0的碱性蛋白胨水或平板中生长良好。此环境中其他细菌不易生长，故碱性蛋白胨水可作为选择性增殖霍乱弧菌的培养基。在碱性平板上形成圆形、光滑、透明、直径为2 mm的菌落。

霍乱弧菌能分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖和甘露醇，产酸不产气，能还原硝酸盐为亚硝酸盐，靛基质试验阳性。其在含硝酸盐及色氨酸的培养基中，产生亚硝酸盐与靛基质，在浓硫酸存在时，呈红色，称为霍乱红反应。

3.抗原构造　霍乱弧菌有耐热O抗原和不耐热H抗原。根据O抗原不同，可分成155个血清群，其中O1群和O139群引起霍乱，其他血清型可引发散在性人类胃肠炎等。O1群霍乱弧菌可分为两个生物型：古典生物型和埃尔托生物型。这两种型别除个别生物学性状稍有不同外，形态和免疫学性状基本相同，在临床病理及流行病学特征上没有本质的差别。O1群霍乱弧菌根据抗原成分不同又可分为三个血清型：稻叶型、小川型和彦岛型。

4.抵抗力　霍乱弧菌古典生物型对环境抵抗力较弱，埃尔托生物型抵抗力较强，在河水、井水、海水中可存活1～3周，在鲜鱼、贝类上可存活1～2周。霍乱弧菌对热、干燥、日光、化学消毒剂和酸均很敏感，耐低温、耐碱。湿热55℃15 min、100℃1～2 min、水中加0.5 mg/L氯15 min可被杀死。0.1%高锰酸钾溶液浸泡蔬菜、水果可达到消毒目的。其在正常胃酸中仅生存4 min。

（二）致病性

1.致病性　人类在自然情况下是霍乱弧菌的唯一易感者，主要通过污染的水源或食物经口感染。在一定条件下，霍乱弧菌进入小肠后，依靠鞭毛的运动，穿过小肠黏膜表面的黏液层，通过菌毛黏附于肠黏膜上皮细胞，在肠黏膜表面迅速繁殖，经过短暂的潜伏期后便急骤发病。该菌不侵入肠黏膜上皮细胞和肠腺，也不侵入血流，仅在局部繁殖和产生霍乱肠毒素，此毒素作用于肠黏膜上皮细胞与肠腺使肠液过度分泌，从而使患者出现上吐下泻，泻出物呈米泔水样并含大量霍乱弧菌，此为本病典型的特征。

霍乱肠毒素为外毒素，本质是蛋白质，为目前已知的最强致泻毒素。不耐热，56℃30 min即可被破坏。具有很强的抗原性。霍乱肠毒素由A和B两个亚单位组成。A亚单位为毒性单位；B亚单位为结合单位，能特异地识别肠上皮细胞上的受体。1个毒素分子由一个A亚单位和5个B亚单位组成多聚体。霍乱肠毒素作用于肠黏膜上皮细胞膜表面上的受体（由神经节苷脂GM1组成），其B亚单位与受体结合，使毒素分子变构，A亚单位进入细胞，进而激活腺苷酸环化酶，使三磷酸腺苷（ATP）转化为环磷酸腺苷（cAMP），细胞内cAMP浓度增高，导致肠黏膜上皮细胞分泌亢进，使大量液体和电解质进入肠腔而发生剧烈吐泻。由于大量脱水和失盐，患者可发生代谢性酸中毒、血液循环衰竭，甚至休克或死亡。(https://www.daowen.com)

2.免疫性　患过霍乱的人可获得牢固的免疫力，再感染者少见。患者在发病数日后，血液中即可出现特异性抗体，病后小肠内可出现分泌型sIgA。sIgA可在肠黏膜与病原菌之间形成免疫屏障，有阻断黏附、中和毒素的作用。

（三）微生物学诊断

由于霍乱流行迅速，且在流行期间发病率及死亡率均高，危害极大，因此早期、迅速、正确的诊断，对治疗和预防本病的蔓延有重大意义。

1.直接镜检　采取患者米泔水样便或呕吐物镜检（涂片染色及悬滴法检查）观察细菌形态、动力特征。

2.细菌分离培养　可将标本接种至碱性蛋白胨水37℃培养6～8 h后，取生长物做形态观察，并转种于碱性平板做分离培养，取可疑菌落进行玻片凝集试验，阳性者再做生化反应及生物型别鉴定试验。

3.特异性制动试验　取检材或新鲜碱性蛋白胨水培养物一滴，置于载玻片上，再加霍乱弧菌多价诊断血清，加盖玻片，用暗视野镜观察，3 min内运动被抑制的即为阳性，此法快速准确、操作简便，但必须有数量较多的霍乱弧菌才能检出。

4.免疫荧光试验　除一般免疫荧光法外，还可用荧光菌球法检查。

（四）防治原则

必须贯彻预防为主的方针，做好对外交往及入口的检疫工作，严防本菌传入，此外应加强饮水、粪便管理，注意饮食卫生。对患者要严格隔离，必要时实行疫区封锁，以免疾病扩散蔓延。特异性预防可皮下注射接种O1群霍乱弧菌死疫苗，可获良好效果。治疗主要为及时补充液体和电解质，应用抗菌药物如链霉素、氯霉素、强力霉素、复方新诺明等。