四、免疫球蛋白的水解片段
免疫球蛋白的铰链区易被胃蛋白酶和木瓜蛋白酶水解,产生不同的水解片段,借此可以用来研究免疫球蛋白的结构与功能,对某些抗体片段进行分离纯化。
1.木瓜蛋白酶水解片段 木瓜蛋白酶作用于Ig铰链区二硫键连接的两条H链的近N端,将Ig水解成两个相同的抗原结合片段(Fab)和一个可结晶片段(Fc)(图27-3)。Fab含有一条完整的L链和H链的VH和CH1区,1个Fab仅结合1个抗原表位,为单价,故不发生凝集反应或沉淀反应。Fc相当于IgG的CH2和CH3区,无抗原结合部位,能与某些效应细胞或分子表面的Fc受体结合。
2.胃蛋白酶水解片段 胃蛋白酶作用于Ig铰链区二硫键链接的两条H链的近C端,将Ig水解成一个含两个相同Fab的大片段F(ab')2和一些小片段pFc'(图27-3)。F(ab')2可同时结合两个抗原表位,为双价,故能发生凝集反应或沉淀反应。pFc'的生物学作用尚不清楚。F(ab')2既保留了Ig的抗原结合部位,又避免了Fc段抗原性引起的副作用,因此被广泛用于制作生物制品。例如,破伤风抗毒素和白喉抗毒素经胃蛋白酶消化提纯后,因去掉了Fc段而大大降低了超敏反应的发生率。(https://www.daowen.com)

图27-3 免疫球蛋白的水解片段(以IgG为例)