4.3.3　组织细胞培养

组织细胞培养是利用体外培养的组织块或单层细胞分离增殖病毒。组织培养即将器官或组织小块于体外细胞培养液中培养存活后，接种病毒，观察组织功能的变化，如气管黏膜纤毛上皮的摆动等。细胞培养是用细胞分散剂将动物组织细胞消化成单个细胞的悬液，适当洗涤后加入营养液，使细胞贴壁生长成单层细胞。病毒接种于细胞后，病毒吸附感染细胞，增殖后，可见细胞出现病变（图4.8），如蚀斑、坏死、变形，或培养物出现红细胞吸附及血凝现象（如流感病毒等），有时还可用免疫荧光技术检查细胞中的病毒。动物病毒常用的细胞有CEF（鸡胚成纤维细胞）、PK-15株（猪肾上皮细胞）、K-L株（中国仓鼠肺）、D-K株（中国仓鼠肾）等。此法多用于病毒的分离、增殖、病毒抗原制备、中和试验、病毒空斑（数量）测定及克隆纯化等。

图4.8　病毒的细胞培养

组织细胞培养病毒有许多优点：

①离体活组织细胞不受机体免疫力影响，很多病毒易于生长。(https://www.daowen.com)

②便于人工选择多种敏感细胞供病毒生长。

③易于观察病毒的生长特征。

④便于收集病毒作进一步检查。

因此，细胞培养是病毒研究、疫苗生产和病毒病诊断的良好方法。但此法由于成本和技术水平要求较高，操作复杂，所以在基层单位尚未广泛应用。