9.2.2 基本原理
细菌细胞微小且无色透明,在普通光学显微镜下不易识别,必须借助染色剂使菌体着色,增加与背景的反差,才能在显微镜下观察菌体的个体形态和部分结构。因此,微生物染色是微生物学中的一项基本技术。由于细胞对染料的毛细现象、渗透、吸附、吸收等物理作用,以及细胞与染料之间离子交换、酸碱亲和等化学作用,染料能使细菌着色,并且因细菌细胞的结构和化学成分不同,而会有不同的染色反应。在一般情况下细菌菌体多带负电荷,所以常用碱性染料进行染色。碱性染料并不是碱,和其他染料一样是一种盐,电离后染料离子带正电,易与带负电的细菌结合而使细菌着色。生物染色常用的碱性染料有结晶紫、美蓝、石炭酸复红、番红等。
美蓝染色法是只用一种染色剂对细胞进行染色。此法操作简便,适用于菌体的一般形态观察,但通常不能显示细胞构造,也不能鉴别细菌类别。(https://www.daowen.com)
染色前必须将菌体涂布于载玻片上并进行固定,其目的是杀死细菌,并使菌体黏附在载玻片上,防止菌体被染色剂冲掉。此外还可增加菌体对染料的亲和力。