9.2.4　操作步骤

1）制备涂片

（1）涂片

取洁净无油载玻片一块，在其中央滴加1小滴无菌水，用接种环以无菌操作法从试管斜面取少许细菌培养物，在载玻片上的水滴中研开后涂成薄的菌膜（直径约1 cm）。如是液体标本，直接用接种环挑取1～2环菌液，涂布于玻片上，制成薄的菌膜。

（2）干燥

将涂布的标本在室温中自然干燥。如需加速干燥，可在酒精灯火焰上方的热气中加温干燥，但切勿在火焰上直接烘烤。

（3）固定

手持玻片一端，涂有菌膜的一面朝上，以其背面迅速通过火焰2～3次，略作加热，以玻片背面触及手背皮肤，以有热感但不觉烫为度。

2）染色(https://www.daowen.com)

（1）染色

将玻片水平放置在玻片架上，在涂片菌膜处滴加碱性美蓝染液，以完全覆盖菌膜为度，染色1～2 min。

（2）水洗

染色后倾去玻片上的染液，手持洗瓶，用细小水流从玻片侧面冲洗，至流下的水基本无色为止。

（3）吸干

用滤纸覆盖在玻片上并轻轻按压，吸干水分。

3）镜检

用油镜观察染色标本。菌体呈蓝色。