荧光显微镜的基本原理及使用

荧光显微镜（fluorescence microscope）是以紫外线为光源，用以照射被检物体，使之发出荧光，然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。荧光显微镜用于观察组织、细胞中的自发荧光、诱发荧光或经荧光染料染色或标记的结构。其特点是标本之所以能够被看到，不是由于光源的照明，而是由于标本内的荧光物质吸收光源而发出的激发光光能，故呈现荧光现象；如果停止照明，则荧光现象立即消失。荧光显微镜用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。细胞中有些物质，如叶绿素等，受紫外线照射后可发出荧光，此为自发性荧光；另有一些物质本身虽不能发荧光，但如果用荧光染料或荧光抗体染色后，经紫外线照射亦可发出荧光，此为继发性荧光；荧光显微镜就是对这类物质进行定性研究和定量研究的工具之一。荧光显微镜技术以紫外光或蓝紫光激发标本中的荧光物质，使之产生各种不同颜色的荧光，通过观察荧光的分布与强弱来测定被检物质。如神经细胞内脂褐素呈黄色自发荧光；儿茶酚胺在甲醛诱发下呈黄绿色荧光；荧光染料吖啶橙可与DNA和RNA结合，使细胞核DNA呈黄绿色荧光，细胞质RNA呈橙红色荧光。(https://www.daowen.com)