荧光显微镜的使用和注意事项
（一）使用方法
1.打开电源，超高压汞灯要预热15min才能达到最亮点。
2.根据标本的荧光指示剂，透射式荧光显微镜需在光源与暗视野聚光器之间装上所要求的激发滤片，在物镜的后面装上相应的阻断滤片。落射式荧光显微镜需在光路的插槽中插入所要求的激发滤片、双色束分离器、阻断滤片的插块，或旋转荧光组件室数码圆盘，分别对应相应标志。
3.用低倍镜观察，根据不同型号荧光显微镜的调节装置，调整光源中心，使其位于整个照明光斑的中央。
4.放置标本片，调焦后即可观察。使用中应注意：未装滤光片不要用眼直接观察，以免引起眼的损伤；用油镜观察标本时，必须用无荧光的特殊镜油；高压汞灯关闭后不能立即重新打开，需待汞灯完全冷却后才能再启动，否则会不稳定，影响汞灯寿命。
5.观察 例如：在荧光显微镜下用蓝紫光滤光片，观察到经0.01%吖啶橙荧光染料染色的细胞，细胞核和细胞质被激发产生两种不同颜色的荧光（暗绿色和橙红色）。
6.荧光亮度的判断标准一般分为四级：
“-”——无或可见微弱荧光；
“+”——仅能见明确可见的荧光；
“++”——可见明亮的荧光；
“+++”——可见耀眼的荧光。
7.荧光图像的记录方法荧光显微镜所看到的荧光图像，一是具有形态学特征，二是具有荧光的颜色和亮度。在判断结果时，必须将二者结合起来综合判断。结果记录根据主观指标，即凭观察者眼力观察。作为一般定性观察，基本上可靠的。随着技术科学的发展，在不同程度上采用客观指标记录判断结果，如用细胞分光光度计、图像分析仪等仪器。但这些仪器记录的结果，也必须结合主观的判断。
荧光显微镜摄影技术对于记录荧光图像十分必要，由于荧光很易褪色减弱，要即时摄影记录结果。方法与普通显微摄影技术基本相同。只是需要采用高速感光胶片如ASA200以上。因紫外光对荧光淬灭作用大，如FITC的标记物，在紫外光下照射30s，荧光亮度降低50%。所以，曝光速度太慢就不能将荧光图像拍摄下来。一般研究型荧光显微镜都有半自动或全自动显微摄影系统装置。
（二）注意事项(https://www.daowen.com)
1.规范操作
严格按照荧光显微镜出厂说明书要求进行操作，不要随意改变程序。
2.应在暗室中进行检查
进入暗室后，接上电源，点燃超高压汞灯5～15min，待光源发出强光稳定后，眼睛完全适应暗室，再开始观察标本。
3.防止紫外线对眼睛的损害
在调整光源时应戴上防护眼镜。
4.检查时间
每次以1～2h为宜，超过90min，超高压汞灯发光强度逐渐下降，荧光减弱，标本受紫外线照射3～5min后，荧光也明显减弱；所以，最多不得超过3h。
5.荧光显微镜光源寿命
光源寿命有限，标本应集中检查，以节省时间，保护光源。天热时，应加电扇散热降温，新换灯泡应从开始就记录使用时间。灯熄灭后欲再用时，须待灯泡充分冷却后才能点燃。一天中应避免数次点燃光源。
6.标本观察
标本染色后应立即观察，因当时荧光最显著，而时间久了荧光会逐渐减弱。若将标本放在聚乙烯塑料袋中4℃保存，可延长荧光减弱时间，防止封裱剂蒸发。若不能马上观察，须储存于干燥盒内，有时在0～5℃储存，可保存1个月左右，仍可呈现特异荧光。此外，长时间的激发光照射标本，也会出现荧光衰减和消失现象，故应尽可能缩短照射时间。暂时不观察时可用挡光板遮盖激发光。标本观察时应采用无荧光油，应避免眼睛直视紫外光源。
7.电源应安装稳压器
电压不稳会降低荧光灯的寿命。