第四节 激光共聚焦显微镜的基本原理及应用
20世纪50年代,在哈佛大学读博士后的Marvin Minsky提出了共聚焦显微镜的基本概念,主要目的是消除普通光学显微镜在探测样品时产生的多种散射光。当时,由于没有足够强度的光源,计算机还没有处理大量数据的能力,故此项发明没有马上引起人们的注意。直到20世纪60年代后,通过提高扫描精度突破了普通宽场成像的分辨率限制,随着光学和电子技术的日趋发展,产生了更稳定和更强的激光、更高效的扫描镜片组、更高效能的光纤、更精细的镀膜技术和更低噪音的检测器等,Marvin Minsky共聚焦显微镜的概念得以实现。20世纪80年代美国Meridian公司创试,并于20世纪90年代推出“激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscope,LSCM)”,被认为是具有划时代意义的高科技产品,曾获得美国“政府新产品奖”和两次“高科技领先技术奖”。近年来,各种适合固定波段激发的荧光探针被不断合成,计算机处理器速度快速发展,图像显示、存储、处理等技术高速发展,进一步推动了LSCM的发展和应用。目前,LSCM已经成为研究分子、细胞和活体组织的常规设备。(https://www.daowen.com)