淋巴细胞及其亚群的分离
淋巴细胞及其亚群分离方法较多，目前常用的有免疫吸附分离法，免疫磁珠法和流式细胞术分离法。
1.免疫吸附分离法
方法原理简述如下：
（1）首先将已知抗淋巴细胞表面标志的单克隆抗体包被聚苯乙烯培养板；
（2）加入淋巴细胞悬液，使具有相应表面标志的淋巴细胞结合到培养板上；
（3）洗脱、去除未结合的淋巴细胞，即可获得具有相应表面标志的淋巴细胞。
例如，用抗CD4抗体包被聚苯乙烯培养板，可将CD4+T细胞与CD8+T细胞相分离。
2.免疫磁珠法（IMB）
方法原理简述如下：
（1）首先将抗淋巴细胞表面标志（如CD3、CD4、CD8等）抗体与磁性微珠结合获得免疫磁珠；
（2）将免疫磁珠加至待分选细胞悬液中，可使具有相应表面标志的淋巴细胞与免疫磁珠结合；
（3）在磁场作用下，通过阳性分选和阴性分选获得实验所需的细胞，其中收获免疫磁珠结合的细胞为阳性分选，收获细胞悬液中未与免疫磁珠结合的细胞为阴性分选。免疫磁珠已有市场化产品，具有操作简单、无须昂贵仪器、所获细胞纯度高等优点，因此得到广泛应用。(https://www.daowen.com)
3.流式细胞术分离法（flow cytometry assay）
流式细胞术分离法是借助荧光激活细胞分类仪（FACS）将荧光标记的细胞进行快速准确鉴定和分类的技术。荧光激活细胞分类仪（简称流式细胞仪）集光学、流体力学、电力学和计算机技术于一体，可对细胞做多参数定量测定和综合分析。
程序原理如下：
（1）将待测细胞悬液与荧光素标记抗体反应后，在压力作用下细胞排成单列经喷嘴喷出形成液滴射流（每个液滴包裹一个细胞）；
（2）在液滴射流与高速聚焦激光束相交处，液滴中细胞受激发光照射可产生散射光并激发各种荧光信号；
（3）上述荧光信号被光电检测器接收可转化为电信号，后者经加工处理存储于计算机中，再用分析软件对数据进行统计处理和图像显示获得结果。
其中分选部件借助光电效应，可使带电微滴通过电场时出现不同的偏向运动，分类收集偏向运动的细胞可供进一步研究使用。
流式细胞仪除分选细胞外，主要用途如下：
（1）定量分析、鉴定活细胞表面或胞内表达的特定分子；
（2）免疫细胞分类和百分计数；
（3）白血病和淋巴瘤的免疫学分型；
（4）细胞周期和细胞凋亡检测。