中性粒细胞功能的测定
（一）中性粒细胞趋化功能的测定
1.琼脂糖平皿法
方法原理简述如下：
（1）在用含小牛血清培养液制备的琼脂糖凝胶板上打3个孔间距离相等的孔；
（2）中孔加待测中性粒细胞悬液，两侧孔分别加趋化因子和对照用培养液；
（3）凝胶板置湿盒内37℃、5%CO2温浴2～3h后，用戊二醛固定、染色、干燥后置显微镜下测定中孔中性粒细胞从孔缘向两侧移行的距离，计算移动指数。
移动指数=趋化运动移行距离/随意运动移行距离
2.微孔滤膜法
方法原理简述如下：
（1）特质48孔趋化小室被孔径3μm的聚碳滤膜分为上下2室；
（2）上室加待测中性粒细胞悬液，下室加趋化因子或对照培养液；
（3）将趋化小室置于37℃、5%CO2培养箱中孵育30min，上室内中性粒细胞迁移至滤膜朝下一面（即细胞面）；(https://www.daowen.com)
（4）用PBS缓冲液洗去滤膜非细胞面上的细胞，再将滤膜置甲醇液中固定后用吉姆萨斯染液染色；
（5）在高倍镜下随机选取5个视野，计数细胞取均值，计算趋化指数（＞2有意义）。
趋化指数=实验组趋化细胞数/对照组趋化细胞数
（二）中性粒细胞吞噬杀菌功能的测定
1.显微镜检查法
将中性粒细胞与白色念珠菌或表皮葡萄球菌共育一定时间取样制片；亚甲蓝染色后在油镜下计数吞噬的中性粒细胞数/未吞噬细菌的中性粒细胞数和每个中性粒细胞吞噬的细胞数。
吞噬率（%）=（吞噬细菌的中性粒细胞数/200个中性粒细胞）×100%
吞噬指数=（200个中性粒细胞吞噬的细菌总数/200个吞噬细菌的中性粒细胞）×100%
2.硝基蓝四氮唑试验
硝基蓝四氮唑（nitroblue tetrazolium，NBT）是一种水溶性淡黄色染料，可被中性粒细胞吞入胞内；中性粒细胞在杀菌过程中产生的超氧阴离子
能使吞入胞内的NBT还原为非溶解性暗蓝色甲臜而成为NBT阴性细胞。因此，光镜下计数NBT阳性细胞百分率即可反映中性粒细胞的杀伤功能。
（曹明强）