实验五 生殖细胞减数分裂
【目的要求】
（1）掌握动植物生殖细胞减数分裂过程和各期特点。
（2）进一步熟练临时玻片制片技术。
【标本、试剂和器材】
（1）蝗虫精巢固定标本、蚕豆花蕾固定标本。
（2）载玻片、盖玻片、镊子、醋酸洋红染液、吸水纸、显微镜。
【实验内容和步骤】
（一）蝗虫精巢精母细胞减数分裂的制备与观察
1.取材与固定 雄性蝗虫（2n=23）腹部末端向上，形似船尾，雌性蝗虫（2n=24）腹部末端分叉。在夏秋季可用新鲜材料，采集成熟雄性蝗虫，剪去头、翅及后肢，剪开腹部前端的背侧，取出腹腔中的2个精巢，放入Carnoy氏固定液（无水乙醇与冰醋酸按3∶1混合即可）30分钟到1小时，再移到95%乙醇中15分钟，最后移到70%乙醇中即可使用，也可长期保存备用。
2.染色与压片 取一小段精巢，用解剖针挑取少量（1 mm以内）精巢小管放到载玻片上压碎，滴醋酸洋红染液一滴，染色20分钟，盖上盖玻片，上覆1～2层吸水纸，用左手手指和中指按住盖玻片边缘（防止错动），用铅笔橡皮头轻轻扣压盖片。
3.镜检 将标本放在低倍镜下找到分裂象，并移至视野中央，换成高倍镜观察减数分裂各个时期形态特点（图3-5-1）。
图3-5-1 蝗虫精母细胞减数分裂
第一次减数分裂包括：前期Ⅰ、中期Ⅰ、后期Ⅰ、末期Ⅰ四个时期。
前期Ⅰ：时间较长，染色体变化复杂，可分为5个时期：
细线期（leptotene）：细胞核较大，染色体细长，绕成一团，难分辨。(https://www.daowen.com)
偶线期（zygotene）：同源染色体开始靠拢配对（联会）形成二价体。配对时先从染色体一端开始，然后扩展到整条染色体，形成二价体。
粗线期（pachytene）：配对的染色体缩短变粗、姐妹染色单体可见配对的同源染色体形成四分体，同源非姐妹染色单体之间出现交叉。
双线期（diplotene）：同源染色体开始分开，但交叉部位仍在一起。
终变期（diakinesis）：染色体变得更加粗短，核仁、核膜消失。
中期Ⅰ：各二价体排列在赤道面上，形成赤道板，纺锤体出现（因压片关系，纺锤不易见）。
后期Ⅰ：配对的同源染色体分开，分别向两极移动，其中一组是11条染色体，另一组是11+X，出现了染色体减半现象。
末期Ⅰ：染色体到达两极，形成染色质，核膜、核仁出现，细胞膜中部溢缩，形成2个次级精母细胞。
第二次减数分裂的过程与有丝分裂相似。
通过2次分裂，一个初级精母细胞形成4个精细胞。精细胞经过变态形成精子。
（二）蚕豆花粉母细胞减数分裂片的制备与观察
1.取材与固定 蚕豆采集刚现蕾的花序，放于Carnoy氏液固定（方法同蝗虫）。
2.染色与压片 从固定好的花序中取呈现白色，大约1 mm左右的花蕾，用镊子剥开花蕾，取出花药2个，放在载玻片上，滴一滴醋酸洋红在花药上，用解剖针轻压花药，挤出花粉母细胞，使花粉母细胞散开，除去花药外壳，加上盖玻片后，用吸水纸盖在盖玻片上，用拇指适度压下，使材料分开，并吸干周围的染液。
3.镜检 蚕豆染色体2n=12条，在镜下观察减数分裂各期形态特点。
植物生殖细胞减数分裂的过程基本和动物生殖细胞相同，从略。
【实验报告】
绘制动物生殖细胞的减数分裂图。