ABO血型的遗传分析
【实验目的】
（1）进一步掌握ABO血型的遗传规律。
（2）学会血型鉴定的基本操作。
【实验准备】
1.材料 人外周血。
2.仪器和器材 显微镜、双凹玻片、高温消毒载玻片、采血针、特种铅笔、强力碘消毒棉球、高温消毒干棉球。
3.试剂 抗A、抗B血型单克隆抗体、生理盐水、五种浓度的PTC溶液（1/300万、1/75万、1/40万、1/5万、1/2.4万）。
【实验原理】
ABO血型是红细胞的一种血型。它是根据红细胞膜表面存在的不同种类的特异性抗原来确定的。这种抗原（凝集原）的主要化学成分是糖蛋白和糖脂，且具有遗传性。在高等动物及人体的血清中，存在着具有抗御异己的特殊蛋白质，总称为抗体。侵入体内的外来物质，因其可引起机体产生抗体，总称抗原。抗体的产生，为动物对外来的物质的一种防御反应，其作用在于消灭外来物质，以免其危害生命，称为免疫反应。这种免疫反应不仅见于异种的动物，也存在于同种的不同个体之间，人类的血清对于不同个体的红细胞，也常具有破坏的作用，使异体的红细胞凝集，最后导致其解体。现已知人类的红细胞膜上有两种抗原，叫作凝集原A和B，血清中有相应的两种抗体，叫作凝集素α和β，凝集素α可使含有凝集原A的红细胞凝集，凝集素β可使含有凝集原B的红细胞凝集。一个人的血清中只能含有不会使自己红细胞凝集的抗体。凡红细胞中含有凝集原A的，血清中则含有凝集素β，红细胞中含有凝集原B的，血清中则含有凝集素α，红细胞中含有A和B的，血清中必然没有抗体，红细胞中不含任何抗原的，血清中则含有凝集素α和β。因此根据红细胞中抗原的种别及有无，人类的血液可分为四型：A、B、AB及O型。人类决定ABO血型的基因位于9号染色体P臂上。其具体情况可见表3-6-1，表3-6-2。
表3-6-1 ABO血型的构成
表3-6-2 抗A、抗B血型单克隆抗体做ABO血型鉴定(https://www.daowen.com)
单克隆抗A、抗B抗体是应用现代生物技术制备的，用以检测人体ABO血型，与人血清制备的抗体用法完全一致。
【实验步骤】
（1）取一洁净的双凹玻片，在两凹的上方用玻璃铅笔分别标上A和B。
（2）在A凹内滴一滴抗A单抗，在B凹内滴一滴抗B单抗，注意两种单抗应严格区分不得混用及混合。
（3）将受检者耳垂和一次性采血针分别用强力碘棉球消毒，耳垂在消毒时按离心方向进行，待干后用采血针刺破耳垂，用消毒载玻片的两端的一角分别采血，然后，将一端的血与抗A单抗混合，另一端的血与抗B单抗混合，静待置3分钟。注意，两凹中的液体绝对不能相互混合，一旦混合必然重做。在耳垂采完血后，应马上用高压消毒的干棉球压在采血创口上，防止继续出血和感染。
（4）取上述双凹玻片，用肉眼或低倍镜观察。看有无凝集现象出现。观察时可将玻片震动数次，如果有凝集发生，则越动凝集块越大，如无凝集，则振动后，血球均匀分散。
（5）为了准确起见，若10分钟过后仍无凝集现象，可延长几分钟，以免造成假阴性的错误。因为有时血型单抗存放时间较长效价降低，或红细胞抗原敏感性低，因此反映时间可能延长。
【实验报告】
（1）写出自己的实验结果，并判断自己的血型。
（3）根据子女出现的血型（合子的表现型）按伯恩斯坦（F.Bernstein，1924）的复等位基因学说推论父母有关血型基因型。