取冻存于-80℃的质粒10ng及100μl感受态细菌（始终置于冰上）轻轻吹打混匀，冰浴30 min。随即放入42℃水浴中热激90s，立即放入冰浴中2 min。加入0.9ml LB液体，于37℃恒温摇床上200rpm×60min温育。将菌液6000rpm离心5min，留50μl上清液将菌体打散，均匀涂布于含适当抗生素的琼脂平板表面（已提前涂布好抗生素，并预热），平板置于37℃倒置培养过夜。(https://www.daowen.com)
