1.8.1　感受态细胞的制备

将1.5ml培养基转入离心管中，冰上放置20min，置于4℃，5000rpm×5min，弃上清液。添加一半菌液体积（750μl）预冷的50mmol/L的CaCl2，用移液器轻轻吹打使细胞悬浮，冰上放置30min，4℃，5000rpm×5min，弃上清液。再加入200μl预冷的50mmol/L的CaCl2溶液，轻轻悬浮细胞，冰上放置备用。新鲜的感受态细胞在24h之内直接用于转化，剩余的加入总体积15%的无菌甘油，混匀后置于-80℃保存。(https://www.daowen.com)