2.2.5 RND3可以在体外调节GBM细胞增殖
高表达RND3组(GFP-RND3)细胞生长与其对照组(GFP)相比,增殖速度明显减慢,差异具有统计学意义(P<0.001)(图2-13A);低表达RND3组(siRND3)细胞生长与其对照组siCtrl相比,增殖速度明显增加,差异具有统计学意义(P<0.001)(图2-13A)。为了进一步验证这一结果,在体外,我们应用另外两个可以反映细胞增殖的方法来研究RND3对细胞增殖的作用,BrdU法和Histone H3蛋白磷酸化水平。BrdU为胸腺嘧啶的衍生物,可代替胸腺嘧啶在DNA合成期(S期),细胞培养加入,而后利用抗BrdU单克隆抗体,ICC染色,可以显示增殖细胞。本研究结果显示,高表达RND3(GFP-RND3)时,BrdU阳性细胞与对照组相比(GFP),明显减少,而低表达RND3(siRND3)时,BrdU阳性细胞与对照组(siCtrl)相比,明显增加(图2-13B,C),这一结果也被另外一个可以反映细胞增殖能力的HistoneH3磷酸化水平所证明(图2-13D)。(https://www.daowen.com)