1.2　方法

1.2.1 接种培养

在超净工作台上按无菌操作接入供试蛹虫草菌种，接种完后于25℃静置1d，之后放入振荡培养箱，在25℃、140r/min条件下培养。

1.2.2 样品预处理

从培养的第3天至第21天每天取样品3个，倒出瓶中的菌丝体及培养液，用双层纱布过滤，分离菌丝体和培养液。菌丝体用蒸馏水清洗2次，冷冻保存。培养液用滤纸过滤后置于冰箱保存待测。

1.2.3 生长量的测定(https://www.daowen.com)

将经预处理的菌丝体放置于恒温干燥箱，于40℃下烘至恒重。用电子天平称重，取3个平行样的平均值，即得生长量。

1.2.4 菌种的选择

按1.2.1操作，依次接种CM001等14株蛹拟青霉菌株，每个菌种接种3瓶，培养20d，倒出瓶中的菌丝体及培养液。菌丝体用蒸馏水清洗2次，冷冻保存。培养液用滤纸过滤后置于冰箱保存待测。选取虫草素产量最大的菌种进行接种下一步试验。

1.2.5 添加添加物培养

分别添加腺嘌呤、甘氨酸、腺苷、L-天冬氨酸、肌苷、丙氨酸、鸟苷、半胱氨酸8种添加物到配好的培养基中，添加量为1g/L，接种菌株为10号和CM001号菌株，培养13d，分别测定菌丝体与发酵液中虫草素含量。