2.3 HSCCC溶剂体系的选择
采用HPLC法测定虫草素在各溶剂体系中的分配系数(K)值,取适量粗提物样品于10mL试管中,用预先达到分配平衡的两相溶剂体系的下相将其溶解,用HPLC进行检测,测得目标组分峰面积为A1,然后取等体积的上相加入此溶液,剧烈振荡让其充分混合,待达到分离平衡后,取下相用HPLC检测,峰面积为A2,则K=(A1—A2)/A2。(https://www.daowen.com)
溶剂体系经测定K值初步确定后,利用分析型HSCCC进一步快速筛选,具体工作参数如下:进样体积500μL,工作转速1800r/min,温度28℃,固定相泵入体积流量5mL/min,流动相体积流量0.5mL/min,检测波长260nm。