大孔吸附树脂分离纯化蛹虫草固体培养基中虫草素工艺
胡 瑕1,2 谢红旗1 罗 巍1 夏志兰1 刘东波1*
(1.湖南农业大学园艺园林学院,国家中医药管理局亚健康干预技术实验室,湖南 长沙 410128;
2.国家柑橘改良中心长沙分中心,湖南 长沙 410128)
摘要:比较D101、AB-8、HPD-100、HPD-400、HPD-500、HPD-722、DM130七种大孔吸附树脂对蛹虫草固体培养基中虫草素的吸附与解吸性能,筛选出HPD 100树脂为最佳树脂,并确定HPD-100树脂吸附分离最佳工艺条件:上样液质量浓度0.6mg/mL、上样流速3BV/h、上样体积6BV;解吸剂为体积分数25%乙醇溶液、解吸流速2BV/h、解吸体积4BV。根据此工艺条件,蛹虫草固体培养基粗提物经HPD-100树脂纯化后,虫草素产品纯度可达14.1%,较粗提物产品提高了8倍多。(https://www.daowen.com)
关键词:虫草素;蛹虫草;大孔吸附树脂
蛹虫草(Cordycepsmilitaris L.)又名北冬虫夏草,属真菌界子囊菌门麦角菌虫草属[1],与我国名贵中药材冬虫夏草(C.sinensis)为同属异种。蛹虫草主要分布于我国吉林、辽宁、陕西、广东等地[2]。虫草素是蛹虫草的主要活性成分之一,是一种腺苷类结构类似物,化学名称3'-脱氧腺苷,分子式为C10 H13 O3 N5[3],多项研究表明,虫草素具有抗菌[4,5]、抗病毒、干扰人体RNA及DNA合成,显著抑制多种肿瘤生长的作用[6]。虫草素目前在药学研究领域和经济市场中都倍受关注,是药物化学中的研究热点,从虫草中分离纯化获得虫草素对于虫草素的药理研究和开发应用十分关键,同时也有利于对虫草资源的开发利用。
目前,文献报道虫草素分离纯化方法主要是离子交换树脂吸附法、氧化铝柱层析、硅胶柱层析分离等[7 10]。近年来大孔吸附树脂分离作为一种新型绿色分离技术,广泛应用于天然产物的提取分离工作中,已成功的应用于多种黄酮类、生物碱类、酚酸类等化合物的分离纯化中[11 15],而且大孔吸附树脂工业生产应用普遍。目前,利用大孔吸附树脂分离虫草素的文献报道不多,吕子明等[14]利用大孔吸附树脂和硅胶色谱柱对蛹虫草子实体活性成分进行分离,分离鉴定了包括虫草素在内的9个化合物。上述分离方法工艺研究不够完善,所选择的树脂类型数量有限。本试验通过对7种大孔吸附树脂的筛选试验,寻找对虫草素具有良好吸附分离性能的树脂,并进一步确定分离纯化的生产工艺,为虫草素的工业生产提供理论基础。