金黄色葡萄球菌(S.aureus)

金黄色葡萄球菌(S.aureus)

1.形态与染色

革兰阳性球菌,直径0.5~1.5μm,排列成葡萄串状(图3-2-1),液体培养基、脓汁、乳汁等染色的标本中常见双球或短链排列的球菌,易误认为链球菌。

2.培养特性

厌氧、兼性厌氧或需氧均可生长。本菌营养要求低,在普通琼脂平板经37℃培养18~24h,形成湿润、光滑凸起、边缘整齐、不透明的圆形菌落,直径1~2mm,有时可达4~5mm。菌落产色素,颜色有灰白色、白色、金黄色或柠檬色等。在血琼脂平板上形成明显的β 溶血; 在高盐甘露醇平板上呈淡橙色菌落;在Baird-Park 琼脂基础培养基上菌落呈黑色或灰色,边缘淡色,为一混浊带,在其外层有一透明圈(双环),用接种针接触菌落有似奶油至树胶样的硬度;在VJ 培养基上培养基变淡黄色,菌落呈黑色;在科玛嘉显色培养基上为紫色或粉红色菌落(图3-2-2)。在普通肉汤中生长迅速,初混浊,管底有少量沉淀,培养23天后可形成很薄的菌环,在管底则形成多量黏稠沉淀。本菌耐盐性强,在7.5%~15% NaCl 培养基中均能生长。

图示

图3-2-1 金黄色葡萄球菌形态

(a)革兰染色;(b)扫描电镜图片

图示

图3-2-2 金黄色葡萄球菌在不同培养基平板上菌落特征

(a)营养琼脂平板;(b)血琼脂平板;(c)高盐甘露醇琼脂平板;(d)Baird-Park 琼脂基础培养基平板;(e)VJ 培养基平板;(f)金黄色葡萄球菌显色培养基平板

3.生化反应

生化反应并不恒定,常因菌株及培养条件而异。血浆凝固酶试验(图3-2-3)、触酶试验阳性,多数能分解甘露醇、乳糖、葡萄糖、麦芽糖、蔗糖,产酸不产气,不产生靛基质,七叶苷试验阴性,详见表3-2-1。

图示

图3-2-3 血浆凝固酶试验

表3-2-1 主要葡萄球菌的生化特性

图示

注:+,阳性;-,阴性;V,反应不定;ND,未确定。

4.分离鉴定(https://www.daowen.com)

(1)金黄色葡萄球菌分离鉴定:不同样品采取不同分离培养方法,脓汁、胸腔积液、心包积液、腹水或取其离心的沉淀物,直接涂片革兰染色镜检,发现革兰阳性球菌,可做出初步判断,直接接种在血琼脂平板上;血液等可接种到葡萄糖增菌肉汤进行增菌,再接种到血琼脂平板上进行分离培养;粪便等应接种到选择性培养基上如高盐甘露醇琼脂进行分离培养,环境样本等可接种到7.5% NaCl 肉汤进行选择性增菌,再接种到血琼脂平板和Baird-Park 平板等进行分离培养。对可疑菌落进行血浆凝固酶试验、触酶试验、分解甘露醇试验,猪葡萄球菌血浆凝固酶试验阳性、不分解甘露醇,而金黄色葡萄球菌分解甘露醇。也可以用商品化细菌试剂盒进行鉴定。金黄色葡萄球菌分离鉴定流程见图3-2-4。

图示

图3-2-4 金黄色葡萄球菌分离鉴定流程

(2)金黄色葡萄球菌与链球菌属鉴别:葡萄球菌属触酶阳性,葡萄糖O/F 试验为发酵型(F),在6.5% NaCl 培养基能生长;链球菌属触酶阴性,葡萄糖O/F 试验为氧化型(O),在6.5%NaCl 培养基不能生长。

(3)葡萄球菌属与其他革兰阳性球菌鉴别:兽医临床常见的革兰阳性球菌,除葡萄球菌属外,还有气球菌属、肠球菌属等。葡萄球菌属与其他革兰阳性球菌属鉴别见表3-2-2。

表3-2-2 葡萄球菌属与其他革兰阳性球菌属鉴别

图示

注:+,90%以上菌株阳性;-,90%以上菌株阴性;d,11%~89%菌株阳性;()提示迟缓反应;ND,未确定。