粪肠球菌(E.faecalis)

粪肠球菌(E.faecalis)

1.形态染色

革兰阳性球菌,圆形或椭圆形,大多数成双或链状排列(图3-3-1),陈旧培养物或在厌氧状态下可呈革兰阴性,无芽孢和荚膜,少数菌株有鞭毛。

图示

图3-3-1 粪肠球菌镜检形态

(a)革兰染色;(b)透射电镜

2.培养特性

需氧或兼性厌氧菌。对环境的耐受性极强,10~45℃均能生长,最适生长温度为35℃。对营养要求不高,在血平板上35℃培养18h 可形成灰白色、表面光滑、直径1mm 大小的圆形菌落,γ 溶血,放置4℃冰箱数天后会出现α 溶血(图3-3-2)。在胰蛋白胨大豆琼脂(TSA)上可生长为灰白色、圆形菌落(图3-3-3)。在麦康凯平板上生长贫瘠,形成粉红色较小菌落,干燥(图3-3-4)。在KF 平板培养48h 后形成边缘整齐、有光泽的暗红色菌落(图3-3-5)。在肠球菌琼脂平板培养24h 后形成带明显的棕色环的棕黑色菌落(图3-3-6)。在肠球菌显色培养基平板上为红色至紫红色。在肠球菌肉汤上培养24h 后肉汤呈黑色(图3-3-7)。在叠氮钠葡萄糖肉汤中培养呈现混浊。

图示

图3-3-2 粪肠球菌在血平板上菌落形态

(a)γ 溶血;(b)α 溶血

图示

图3-3-3 粪肠球菌在TSA 平板上的菌落特征

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图3-3-4 粪肠球菌在麦康凯平板上的菌落特征

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图3-3-5 粪肠球菌在KF 平板上菌落特征

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图3-3-6 粪肠球菌在肠球菌琼脂平板上菌落特征

3.生化反应

触酶试验阴性,分解甘露醇和山梨醇,不发酵L-阿拉伯糖,胆汁七叶苷试验阳性,在含6.5% NaCl 肉汤中生长,多数菌株吡咯烷酮芳胺酶(PYR)试验和亮氨酸氨肽酶(LAP)试验阳性,对杆菌肽耐药。生化特性详见表3-3-1。(https://www.daowen.com)

4.细菌鉴定

(1)肠球菌分离鉴定流程:粪便、肛门拭子等样品先采集到运输培养基,再接种到肠球菌琼脂、KF 琼脂、肠球菌显色琼脂等培养基上;心、肝、肺等病料直接接种到血平板,对革兰阳性、触酶阴性可疑菌落纯化后再进一步进行鉴定。具体流程见图3-3-8。

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图3-3-7 粪肠球菌在肠球菌肉汤上培养特性

(2)肠球菌与其他细菌鉴别:主要有以下几种。

① 与链球菌属的鉴别:肠球菌属能在pH 9.6 肉汤和45℃生长,胆汁七叶苷和耐盐试验阳性;链球菌属则相反。

② 粪肠球菌与屎肠球菌、鸟肠球菌的鉴别:粪肠球菌不分解L-阿拉伯糖,分解山梨醇;屎肠球菌能分解L-阿拉伯糖,不分解山梨醇;鸟肠球菌分解L-阿拉伯糖和山梨醇。

表3-3-1 肠球菌属常见菌种的生化特性

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图3-3-8 肠球菌分离鉴定流程