肺炎克雷伯菌(K.pneumoniae)

肺炎克雷伯菌(K.pneumoniae)

肺炎克雷伯菌归类于克雷伯菌属(Klebsiella),为典型的肠杆菌科细菌,有肺炎亚种(pneumoniae)、臭鼻亚种(ozaenae)和鼻硬结亚种(rhinoscleromatis)3 个亚种。本菌在所有哺乳动物中常见,可引起马子宫炎、奶牛乳腺炎、皮肤脓肿等症状;人体主要存在于肠道和呼吸道,可引起支气管炎、肺炎、尿路感染等,甚至导致败血症、脑膜炎。

1.形态染色

革兰阴性直杆菌,大小(0.3~1.0)µm×(0.6~6.0)µm,呈单个、成对或短链排列,常包裹一层荚膜,多数有菌毛,无运动性,见图5-3-1。

2.培养特性

(1)培养条件:兼性厌氧。对营养要求不高,普通琼脂即可生长。

图示

图5-3-1 肺炎克雷伯菌的镜检形态

(a)革兰染色;(b)透射电镜图

(2)常用培养基上的生长形态:在血平板形成圆形、凸起、光滑、湿润、黏稠、不溶血的大菌落,相邻菌落易发生融合,用接种环挑起呈长丝状(图5-3-2)。在木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂平板(XLD)上呈黏液样黄色菌落(图5-3-3)。在麦康凯琼脂平板生长良好,形成粉红色菌落(图5-3-4)。在伊红美兰琼脂平板上可形成黑色菌落(图5-3-5)。

3.生化反应

氧化酶试验阴性,过氧化氢酶试验阳性,发酵葡萄糖、乳糖等多种糖类,三糖铁斜面为A/A,硝酸盐还原、脲酶和赖氨酸脱羧酶试验阳性,动力试验阴性。

图示

图5-3-2 绵羊血琼脂

图示

图5-3-3 XLD

图示

图5-3-4 麦康凯琼脂

图示

图5-3-5 伊红美兰琼脂

4.分离鉴定(https://www.daowen.com)

(1)分离鉴定流程同大肠埃希菌。

(2)生化鉴定

① 克雷伯菌属内菌种的鉴别参见表5-3-1。

表5-3-1 克雷伯菌属内常见细菌的鉴别

图示

注:部分引自《伯杰氏细菌系统分类学手册》(第二版)卷二第687 页。符号:+,95%~100%的菌株阳性(利用测试1~2 天或其他测试1 天);(+),95%~100%的菌株阳性(1~4 天);-,95%~100%的菌株阴性(4 天);d,不确定。

② 肺炎克雷伯菌各亚种的鉴别:肺炎亚种的临床株可产生超广谱β-内酰胺酶,臭鼻亚种主要与臭鼻症其他慢性呼吸道疾病相关,鼻硬结亚种则常见于患鼻硬结病的病人。三者生化反应的差异见表5-3-2。

表5-3-2 肺炎克雷伯菌各亚种的生化特性

图示

注:部分引自《伯杰氏细菌系统分类学手册》(第二版)卷二第687 页。符号:+,95%~100%的菌株阳性(利用测试1~2 天或其他测试1 天);-,95%~100%的菌株阴性(4 天);d,不确定。

(3)商品化生化鉴定试剂及鉴定系统:在使用商品化鉴定试剂及鉴定系统鉴定时可能出现“低鉴定率”,需要附加生化试验才能显著提升其鉴定准确率。

(4)MALDI-TOF MS 鉴定:随着基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术的普及,已被越来越多的应用于临床实验室(图5-3-6),并已经过多个中心的研究和评估,检测结果是可靠的。

图示

图5-3-6 多种肠杆菌科细菌的质谱分析