副溶血弧菌（V.parahaemolyticus）

副溶血弧菌（V.parahaemolyticus）

副溶血弧菌具嗜盐性，存在于海产品中，主要引发水生动物疾病。近年来，从我国人工养殖发病死亡的海鱼、贝类等也能分离到该菌。

1.形态染色

革兰阴性小杆菌，菌体呈多形性，为直的、轻微弯曲、弯曲或逗点状杆菌，大小为（0.5～0.8）µm×（1.4～2.6）µm，有极性鞭毛，在老龄培养物或不利生长环境中常形成内卷（图7-1-1）。

2.培养特性

（1）培养条件：副溶血弧菌兼性厌氧。在30～40℃均能生长良好，4℃不生长。最适pH 为7.7～8.0。本菌在含1%～8% NaCl 的培养基均能生长，生长所需NaCl 的最适浓度为3%～4%。

（2）常用培养基：TCBS 琼脂作为一种选择性培养基，被广泛应用于临床和环境样本中弧菌的分离，多数情况下副溶血弧菌在TCBS 上生长为绿色黏稠菌落；碱性蛋白胨水是使用最多的液体培养基，可用于弧菌的分离和增菌培养，其NaCl 浓度通常为0.5%～1%，为增强其选择性可增加至3%；在绵羊血琼脂平板上生长良好，呈光滑、湿润、凸起的半透明菌落，通常不溶血，某些菌株可形成α 或β 溶血；在麦康凯平板上呈无色半透明菌落，部分菌株不生长或生长不良。在3% NaCl 三糖铁琼脂上生长，底层变黄不变黑，不产气，斜面颜色不变；在弧菌显色培养基上呈紫红色，也可在其他含7.5% NaCl 的培养基生长（图7-1-2）。

3.生化反应

氧化酶试验、赖氨酸脱羧酶和硝酸还原试验阳性，发酵葡萄糖、麦芽糖，不发酵乳糖、蔗糖、吲哚，在0% NaCl 和10% NaCl 蛋白胨水中不生长。常用生化试验见表7-1-1。

4.分离鉴定

（1）分离鉴定流程：见图7-1-3。

（2）与其他细菌的鉴别：主要有以下几种。

① 弧菌属的鉴别：弧菌属的鉴定与相关菌属的区别，可依据嗜盐性、甘露醇、O/129 敏感性等加以鉴别，参见表7-1-2。(https://www.daowen.com)

② 弧菌属内细菌的鉴别：通过嗜盐性试验、TCBS 生长、O/129 敏感性等试验进行鉴别，详见表7-1-3。

③ 商品化生化鉴定试剂及鉴定系统：目前可用于鉴定弧菌的商品化生化鉴定系统较多，但均存在问题，不同弧菌的鉴定率差异较大，目前报道副溶血型弧菌鉴定准确率最高的是API 20E。

④ 分子生物学鉴定：分子生物学鉴定方法广泛应用于副溶血弧菌的快速检测。弧菌属细菌的种间序列差异较小，16S rRNA 测序技术结果不理想；目前国内针对gyrase、dna J、tox S 等基因分别建立了实时荧光PCR 方法、MPCR-DHPLC 法、环介导恒温扩增（LAMP）法等检测方法。

⑤ MALDI-TOF MS 鉴定：基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）技术已证明是一种可以鉴定副溶血性弧菌的快速、可重复的方法，有望成为鉴别亲缘关系非常接近菌种的新手段（图7-1-4）。