嗜水气单胞菌（A.hydrophila）

嗜水气单胞菌（A.hydrophila）

嗜水气单胞菌广泛存在于淡水和海洋水域、病鱼、变温的水生动物和温血动物，是多种水生动物的原发性致病菌，可引起人的腹泻和肠道外感染。

1.形态染色

革兰阴性无芽孢杆菌，菌体呈多形性，多为球杆状或杆状，常单个存在，很少成对或短链状排列，大小为（0.3～1.0）µm×（1.0～ 3.5）µm，有 极 性鞭毛，可形成狭窄的荚膜（图7-2-1）。

2.培养特性

（1）培养条件：兼性厌氧，在水温14.0～ 40.5℃都可繁殖，以28.0～30.0℃为最适温度。pH 为6～11 均可生长，最适pH 为7.27。可在含盐量0 ～0.4%的水中生存，最适盐度为0.05%（图7-2-2）。

（2）常用培养基：在普通营养琼脂上即可生长，形成圆形、凸起、光滑湿润的菌落，直径可达1～3mm；在绵羊血琼脂平板上生长，菌落呈灰白色，并形成不同程度的β 溶血；在麦康凯培养基上生长良好，不发酵乳糖；在TCBS 或在6% NaCl 培养基中不生长；在RS 培养基上呈黄色菌落；在AHM 培养基上生长，试管底部呈淡黄色或灰黄色，上部为紫色；在脱脂奶蔗糖胰蛋白胨平板上生长，菌落周围可出现清晰透明的溶蛋白圈。详见图7-2-3。

3.生化反应

氧化酶、触酶、吲哚试验阳性，H2S 试验阳性，发酵葡萄糖、蔗糖、阿拉伯糖，产酸产气，不发酵乳糖，TSI 为K/A，七叶苷、精氨酸双水解酶、赖氨酸脱羧酶和硝酸盐还原试验均为阳性，O/129 耐药。常用生化试验见表7-2-1。

4.分离鉴定

（1）分离鉴定流程：本菌的检验程序基本同肠道致病菌相同，可直接培养（如脏器、分泌物等），或先增菌再分离培养（如粪便、水样等），具体的分离鉴定流程可参考图7-2-4。

（2）与其他细菌的鉴别

① 气单胞菌属的鉴别：气单胞菌属容易与氧化酶阳性的邻单胞菌属和弧菌属的细菌混淆，除了可以通过其在不同培养基上的生长特性进行区分，也可以通过一系列的生化反应加以鉴别，参见表7-2-2。

② 气单胞菌属内细菌的鉴别：主要通过生化反应的差异加以鉴别，参见表7-2-3。

（3）商品化生化鉴定试剂及鉴定系统：可用于鉴定嗜水气单胞菌的商品化生化鉴定系统较多，但鉴定的准确率差异较大，以API 20E 试剂条和VITEK 2 GN 卡的准确率最高。

（4）序列分析：通过气单胞菌16S rRNA 基因的分析，目前可以准确鉴定到属的水平，比较准确鉴定到种的水平则需要使用其他管家基因组合如gyrB、rpoD、dnaJ、cpn60 等作为多重分子标记或多位点进化分析（MLPA）等方法。

（5）MALDI-TOF MS：基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）技术于2007 年第一次应用于气单胞菌种的鉴定，目前已广泛应用于临床，根据不同细菌蛋白质谱的差异可快速区分和鉴定出嗜水气单胞菌（图7-2-5），其鉴定准确率高于16S rRNA 测序及传统的生化鉴定方法。