鼻疽伯氏菌(B.mallei)
鼻疽伯氏菌旧名鼻疽假单胞菌,1882 年首次从病马的肝脏和脾脏中分离到,曾被归类于假单胞菌科、假单胞菌属Ⅱ群。Yabuuchi 等根据16S rDNA 序列分析于1992 年将其归类于假单胞菌科的伯氏菌属。鼻疽伯氏菌是马属动物的高度专性寄生菌,经气溶胶传播,可感染人类。由鼻疽伯氏菌感染引起的马鼻疽(Glanders)是一种人兽共患传染病,生物安全风险较大,我国将其列为二类动物疫病。
1.形态染色
鼻疽伯氏菌为革兰阴性杆菌,菌体细长,长短不一,长2~5µm,宽0.5~1.0µm,两端浓染,无芽孢,无鞭毛,有荚膜。(图8-3-1)。苯胺染料易于着色。
图8-3-1 伯氏菌扫描电镜照片
2.培养特性
本菌专性需氧,普通培养基中生长缓慢,加5%绵羊血或1%~5%甘油生长旺盛。在血琼脂平板上35~37℃培养48h,可见无色、透明、大小不等、边缘不整齐、不溶血的较小菌落(图8-3-2);在甘油培养基上菌落呈圆形、湿润、光滑、不透明的灰黄色菌落;在麦康凯培养基上呈凸起、湿润、中等大小、淡黄色的菌落。正常菌落为光滑(S)型,变异的菌落最常见的为粗糙(R)型。
图8-3-2 鼻疽伯氏菌在血液琼脂平板上的生长形态
3.生化反应(https://www.daowen.com)
鼻疽伯氏菌可分解葡萄糖、乳糖,不分解其他糖类,不分解醇类。尿素阳性,还原硝酸盐,部分菌株氧化酶阳性。部分菌株脂酶(水解吐温80)阴性,可使石蕊牛乳产酸凝固及胨化,具体见表8-3-1。
表8-3-1 鼻疽伯氏菌的生化特征
4.分离鉴定
(1)分离鉴定流程:鼻疽伯氏菌分离仅允许在生物安全三级实验室进行,分离鉴定流程见图8-3-3。将病料接种于培养基,多种培养基均可培养鼻疽伯氏菌。在添加3%甘油的脑心浸润琼脂上,典型的鼻疽伯氏菌为圆形、无定型的半透明菌落。将疑似感染菌接种雄性豚鼠腹腔,可引起雄性豚鼠典型的睾丸炎和睾丸周围炎。睾丸肿胀化脓而后破溃,称为Strauss(施特劳斯)反应,具有一定诊断价值,也可进行鼻疽伯氏菌鉴定。
图 8-3-3 鼻疽伯氏菌的分离鉴定流程
(2)PCR 检测:普通PCR 和荧光PCR可从病变组织、结节和全血白细胞层中检出本菌。针对部分基因设计的引物可以区分鼻疽伯氏菌、类鼻疽伯氏菌。此外,利用16S rRNA 基因序列也可快速鉴别鼻疽伯氏菌和伪鼻疽伯氏菌。