诺卡菌(Nocardia)
1.染色形态
诺卡菌为革兰阳性菌,菌体多呈细长、分枝状或串珠状,老龄菌可断裂成杆状或球状、链球菌样孢子、孢子丝(图10-3-1)。诺卡菌细胞壁含有分枝菌酸,故抗酸染色呈阳性。但大多数诺卡菌为弱阳性,抗酸染色法需进行改良并设立对照。
2.培养特性
诺卡菌为需氧菌。对营养要求不高,普通培养基和真菌培养基均可生长。培养最适温度37℃,室温也可生长。该菌增殖速度慢,初次分离培养通常需要1 周的时间,因此在临床分离中常被忽视。
诺卡菌在不同培养基上会出现不同的菌落形态。一般情况下,该菌菌落干燥、表面粗糙、致密,菌落可生长深入培养基内部,可见气生菌丝。不同菌株在不同培养基上可出现多种菌落颜色,目前有报道的菌落颜色包括白色、黄色、黄褐色、浅粉色、紫色等(图10-3-2)。
3.生化特性
诺卡菌淀粉和明胶试验大多为阴性,触酶试验为阳性,分解葡萄糖,多数不分解甘露醇、肌醇、酪氨酸、酪蛋白和黄嘌呤。不同菌属的生化特性也存在一定差异,具体见表10-3-1。
4.分离鉴定
(1)分离培养时间长:诺卡菌的分离培养时间1~28 天不等,通常初次分离培养时长超过1 周,因此在临床上非常容易被忽视。有报道建议,在对疑似诺卡菌感染的病料至少进行分离时培养2 周以上。(https://www.daowen.com)
(2)细菌特性:诺卡菌菌落干燥,与培养基结合紧密,常不易被接种环挑取;细菌具有黏附性,常黏附于刮取的接种环上;菌落形态褶皱、致密,可形成气生菌丝。
(3)诺卡菌与分枝杆菌的鉴别:诺卡菌与分枝杆菌可通过革兰染色和抗酸染色进行鉴别。诺卡菌革兰染色呈强阳性,抗酸染色呈弱阳性,常出现染色不均,盐酸乙醇易脱色;分枝杆菌革兰染色弱,抗酸染色强,不易脱色。
图10-3-1 诺卡菌不同形态染色及显微镜检
(a)、(b)、(c)为显微镜下不同形态的诺卡菌;(d)为诺卡菌属孢子丝镜检形态;(e)为诺卡菌属链球菌样孢子的扫描电镜照片
(a、b、c 引自张媛,张媛媛,万康林等.诺卡菌的培养和染色特征研究[J].中国人兽共患病学报.2012,28(3):230-235;d、e 引自百度文库)
图10-3-2 诺卡菌不同菌落形态及颜色示意
A、B、C 示意不同培养基上诺卡菌属的不同菌落形态及颜色特性;D、E、F 依次为A、B、C 的放大单个菌落形态
(引自陈微.奶牛乳房炎性诺卡菌Nocardia cyriacigeorgica 分离鉴定和致病机制研究[D].北京:中国农业大学,2017)
表10-3-1 不同诺卡菌的生化特性
注:+,90%以上菌株阳性;-,90%以上菌株阴性;V,11%~89%菌株阳性;ND,无资料。