一、灭菌法
（一）热力灭菌
是一种应用最早、效果最可靠、使用最广泛的方法。包括湿热灭菌法和干热灭菌法。湿热灭菌法包括高压蒸汽灭菌法、流通蒸汽灭菌法（常压蒸汽灭菌法）、煮沸法、低温蒸汽灭菌法。干热法包括对外科器械的烧灼灭菌，烤箱内干烤灭菌，红外线辐射灭菌，在焚烧炉内焚烧特殊感染敷料及病人尸体等。
1.高压蒸汽灭菌法 高压蒸汽灭菌的原理是导致微生物蛋白质的变性和凝固。蒸汽是无害、无味的，高压蒸汽灭菌后的物品使用绝对安全，高压蒸汽灭菌速度快、温度高、穿透力强，故而效果可靠，应用最普遍。目前使用的高压蒸汽灭菌器可分为下排气式和预真空式两种。
（1）手提式高压蒸汽灭菌器 是实验室、基层医院和科室常用的小型高压蒸汽灭菌器。为单层圆筒，内有一个铝制的盛物桶。使用时在高压锅内放入约4cm 深的清水，将需灭菌的物品放入盛物桶内，放入的物品不宜过多，待灭菌物品间要有孔隙；盖上锅盖，将排气软管插入盛物桶壁上的方管内，拧紧螺丝；将高压锅放火源上加热，待水沸腾10～15min 后打开排气阀，放出冷空气，至有蒸汽排出时关闭排气阀，使锅内压力逐渐上升；到所需压力时，调节火源，维持到预定时间。离开火源，打开放气阀，排出蒸汽，使压力恢复到“0”位时，打开盖子，取出灭菌物品。若灭菌液体，应慢慢冷却，以防止减压过快造成猛烈沸腾而使液体外溢和瓶子破裂或爆炸。
（2）立式高压蒸汽灭菌器 是一种老式的高压蒸汽灭菌器，使用方法同手提式高压蒸汽灭菌器。
（3）卧式高压蒸汽灭菌器 优点是使用外源蒸汽，不会因加水过多而浸湿灭菌物品；灭菌物品的放取比较方便；不会因灭菌物品堆放过高而影响蒸汽流通。
（4）预真空式高压蒸汽灭菌器 是目前各大型、中型医院普遍采用的一种高压蒸汽灭菌方法。在灭菌前预先将灭菌器内抽成真空，然后打开外源蒸汽阀门，使蒸汽快速进入灭菌包内。优点是：能明显缩短灭菌时间；灭菌效果确实，特别是对于较大和较密实的灭菌包，能使高压蒸汽快速进入灭菌包的深部；灭菌敷料干燥，极少产生冷凝水。
2.流通蒸汽灭菌法 是指在101.325kPa（1atm）下，用100℃的水蒸气进行灭菌。方法简便。家庭用的蒸笼也是简易的流通蒸汽灭菌器。常用于一些不耐高温物品的灭菌。在农村或野外条件下可因地制宜用于医疗灭菌。敷料包要小，外面再包两层纸张；蒸笼须密盖；水煮沸后继续加热60min，可达灭菌目的；蒸毕将物品取出烤干或晾干备用。
3.煮沸法 煮沸法是使用最早的方法之一，方法简单、方便、经济、实用，且效果较可靠。手术室、基层医院和村卫生室仍在使用。有专用的电或酒精煮沸器。一般铝锅去油脂后也可用。适用于玻璃、橡胶、金属器械，但可使锐利的手术器械锋利性受损，紧急情况也可煮沸消毒。水煮沸至100℃后，持续15～20min，一般细菌可杀死；对被肝炎病人污染的物品和器械，应煮沸30min；带芽孢的细菌，需至少煮沸1h 以上才能杀灭。如在水中加增效剂碳酸氢钠，使成2%碱性溶液，沸点可提高到105℃，时间可缩短到10min，同时还可以防止金属器械生锈。高原地区气压低、沸点低，故海拔高度每增高300m，灭菌时间应延长2min，或用高压锅煮沸灭菌10min 即可。对不耐100℃高温的物品，在水中加少量增效剂如0.2%甲醛或0.01%氯化汞（升汞），经80℃处理60min，也可达到灭菌效果。
注意事项如下。
①灭菌时间应从水煮沸后算起，如果中途加入新的物品，应重新计算时间。
②一次煮沸放的物品不宜过多，应不超过容器容量的3／4，被灭菌物品必需完全浸泡于水中，才能达到灭菌目的，灭菌器要加盖关闭，以保持煮沸温度。
③橡胶和丝线类应于水煮沸后放入，煮沸15min 后取出，以免时间过长影响质量。(https://www.daowen.com)
④玻璃制品需用纱布包好，放入冷水中开始煮沸，以免骤热或互相碰撞而破裂，锅底垫纱布，以防震动，注射器应将针筒、针芯拆开包好分放。
⑤灭菌物品应保持清洁，灭菌前应做冲洗。
⑥不透水物品，如盘、碗应垂直放置，棉织品煮沸要略加搅拌以利水的对流。
⑦灭菌后，物品取出慎防再污染，器械灭菌后，可将水放出去，利用消毒器加热烘干。
4.低温蒸汽消毒法 目前国外医院常用由高压锅改造的低温蒸汽装置，即在低于大气压下，73～80℃，加或不加甲醛，来处理怕高热物品，如各种内窥镜、塑料制品、橡胶制品、麻醉面罩等。灭菌快、比较经济、易控制。
5.烧灼法 在紧急情况下，或没有其他办法应付的情况下，对手术器械可用此法。将器械放在搪瓷或金属盒中，倒入90%酒精少许，点火直接在火焰上烧灼，该法温度高、效果可靠。但烧灼可使器械变钝，又失去光泽，一般不宜做常规应用。
6.电烤箱和红外线烤箱 此法也是干热灭菌中的一种方法。利用高热烘烤进行灭菌，只应用于不怕高温的金属器械、玻璃、陶瓷、油剂等，不适用棉纤制品、塑料制品等的灭菌。灭菌后物品是干的，便于使用，缺点是所需温度高、时间长。
（二）电离辐射灭菌
利用丁射线、伦琴射线或电子辐射能穿透物品，杀灭其中微生物的低温灭菌方法，称为电离辐射灭菌。医疗用品辐射灭菌是20 世纪50 年代逐步发展起来的一种新的灭菌方法。手术缝线、纱布、脱脂棉、卫生纸、外科手术器、手术敷料等均可用此法灭菌。
优点是：①灭菌均匀彻底，无环境污染，能杀死各种微生物。②使用价格便宜，节约能源，比加热法省钱又省能源。③穿透力强，可对密封包装物品进行灭菌，消毒后长期保存，随时可用。④速度快，操作简单，可连续作业，可对一次性医疗用品大量生产。⑤为冷灭菌，即在常温下灭菌，适合于热敏材料，如生物制品（羊肠线、人工瓣膜等）、塑料制品、尼龙制品等。所以电离辐射灭菌法使用越来越广泛。
缺点是：一次性投资大，需要专门管理人员。
（三）微波灭菌法
微波是一种波长短而频率较高的电磁波，在有一定含水量的条件下的热效应是微波杀菌的主要原因。微波加热的明显优点是对物体内部直接加热，因此灭菌时物品内外可同时增温，所需加热时间短，对物品的损害较其他热灭菌法为轻。可用于手术器械包、敷料包、安瓿针剂及中药丸灭菌。微波可透过玻璃、陶瓷、聚丙烯等，故物品可甩上述材料包装后灭菌。缺点是费用较高，且对人体有一定的损害，故国内医院尚未推广使用。