酪氨酰残基的碘化和偶联

在碘化过程中，Tg二聚体中只有132个酪胺酸残基会被碘化生成MIT和DIT[116]。人的Tg肽链内含有4个主要激素生成位点分别为：第5位、第1291位、第2554位和第2747位；还有3个次要激素生成位点：第2568位、第685位和第513位[117]。

T3和T4的形成是通过MIT和DIT的偶联完成的（图7-8）。碘化和偶联都发生于Tg上，而且偶联反应也是在H2O2存在的条件下有TPO催化完成的。在偶联过程中，先形成MIT或DIT自由基。这个过程是在H2O2存在条件下由TPO催化的。H2O2将TPO-FeⅢ氧化为复合物Ⅰ（π+-FeⅣ），同时Tg上的一个DIT失去1个电子形成DIT自由基（Tg-DIT·），Tg上的另一个DIT再失去1个电子形成两个DIT自由基（·DIT-Tg-DIT·），同时FeⅣ还原为FeⅢ，即回到TPO-FeⅢ的状态。DIT的自由基也有两种：一种为苯自由基，另一种为苯氧自由基。

在偶联反应中，提供苯DIT自由基的是供体，提供苯氧DIT自由基的是受体，反应过后受体酪氨酸残基称为碘甲状腺原氨酸，供体酪氨酸转变为脱氢丙氨酸，但是两者仍位于Tg内。偶联过程中供体和受体可以来自一条多肽链或多条多肽链，前者称为分子内偶联，后者称为分子间偶联，但是分子内偶联可能是主要的形式。酪氨酸残基的供体位点主要为第130位、第847位和1448位，其中130位酪氨酸残基是优先的供体位点。第5位酪氨酸残基是最主要的T4生成位点，第5位酪氨酸残基非常接近Tg的氨基末端，生成40%的T4。第二个重要的位点是第2554位，负责生成20%～25%的T4。第2554位酪氨酸位点主要负责T3的生成。(https://www.daowen.com)

过氧化物酶催化的Tg内选择性酪氨酸残基的碘化反应可能在酶上发生[118]。MIT和DIT是体外反应系统中最常见的碘化残基。将131I标记的Tg分别在有或无TPO的情况下进行培养，可以验证TPO在偶联反应中的催化作用，在TPO存在的情况下，T3、T4合成明显增加，反应会更多消耗DIT，相对较少地消耗MIT。类似于低碘饮食的小鼠模型，T3在低碘浓度的情况下合成显著增加。低浓度的游离DIT会刺激偶联反应，游离DIT会发生氧化反应，从而促进了电子从DIT转移至血红素辅基。

图7-8　偶联反应是在H2O2存在的条件下由TPO催化完成的，H2O2将TPO-FeⅢ氧化为复合物Ⅰ（π+-FeⅣ），同时Tg上的一个DIT失去1个电子形成DIT自由基（Tg-DIT·），Tg上的另一个DIT再失去1个电子形成两个DIT自由基（·DIT-Tg-DIT·），同时FeⅣ还原为FeⅢ，即回到TPO-FeⅢ的状态