4.3.3　杨树品种SRAP遗传多样性分析

4.3.3　杨树品种SRAP遗传多样性分析

4.3.3.1　SRAP的多态性

本试验随机选取了31对SRAP引物对采自辽宁不同地区的17个杨树材料进行了PCR扩增，31对引物在所有的供试材料中均有多态性，在17个杨树个体间共扩增出719个清晰的可辨认条带，片段长度集中在100～1 000 bp，17个杨树品种的相似系数在36.2%～97.6%。其中多态性条带有685个，多态性比率为95.3%，平均每个引物扩增出23.2条带，多态性条带22.1条。从统计数据来看，杨树的SRAP标记多态性水平较高。

图4-30　引物组合在17个杨树材料中扩增出的SRAP条带

4.3.3.2　品种内和种间遗传多样性分析

将31对引物组合扩增出的719条电泳谱带建立0，1数据库，利用计算出的各材料间的遗传相似系数对采集自不同地区的3种杨树种内遗传多样性分析表明，2个小胡杨材料间扩增出17条多态性条带，遗传相似系数为0.976 4；2个意大利45杨间扩增出124条多态性条带，遗传相似系数为0.800 5；3个辽宁杨间扩增出83条多态性条带，遗传相似系数为0.881 9。这些杨树等位基因变异频率的广泛分布暗示不同杨树群体内存在一定水平的遗传多样性。各杨树品种之间的遗传相似系数在0.362 2～0.947 5，平均相似系数为0.654 9。其中银中杨和毛白杨的遗传相似系数最大（0.947 5），表明它们之间具有较小的遗传差异；意大利45杨（新民）和毛白杨的遗传相似系数最小（0.362 2），显示它们彼此存在较大的遗传差异。

4.3.3.3　聚类分析及主成分分析(https://www.daowen.com)

根据SRAP扩增结果建立遗传相似系数矩阵，按UPGMA进行聚类分析，将17个杨树材料划分为4个群（图4-31）。其中荷兰64杨、意大利214杨、107杨、意大利45杨（新民）和意大利45杨（锦州）为群Ⅰ；辽育1号、辽宁杨（盘锦）、辽宁杨（新民）和辽宁杨（丹东）为群Ⅱ；群众杨、东港小钻杨、小胡杨（锦州）、小胡杨（盘锦）和小叶杨为群Ⅲ；新疆杨、银中杨和毛白杨为群Ⅳ。

与已知系谱比较发现，群Ⅰ的5个材料均属于国外引进的欧美杨杂交品种，属黑杨派；群Ⅱ的4个材料为辽宁省杨树研究所通过美洲黑杨与欧美杨人工杂交选育出的适合辽宁地区生长的优良速生杨品种，也属于黑杨派；群Ⅲ中的5个材料为青杨派中的小叶杨，及以小叶杨为亲本与黑杨派杨树品种杂交获得的3个杂交种；群Ⅳ中的3个材料同属于白杨派（新疆杨、毛白杨）及其派间杂种（银中杨）。以上分类结果表明，利用SRAP标记进行遗传多样性分析与传统分类结果基本一致，能够较准确地反映各杨树品种间的亲缘关系。

图4-31　17个杨树材料的聚类分析树状图

另外，利用SRAP数据矩阵，对17个杨树材料进行主成分分析见图4-32，第一、第二、第三主成分的贡献率分别为29.61%、26.38%、9.27%。位置相近表示亲缘关系近，远离表示亲缘关系远，因此能够比聚类分析图更加直观地揭示各个材料间的亲缘关系。从图4-32中可以看出，通过不同层面、不同方向更加直观清晰地显示17个材料之间的亲疏关系。将图4-31与图4-32比较表明，聚类分析与主成分分析的结果基本一致，4个群体的划分完全相同。

图4-32　17个杨树材料的主成分分析图