3.3.2 植物脱病毒方法
1）物理方法
（1）高温处理
高温处理即热处理，又称温热疗法。高温处理去除病毒的主要原理是病毒受热后不稳定，活性钝化，繁殖能力下降，失去侵染能力。而植物细胞分裂加速，不受高温伤害。高温处理方法简单，效果明显。但该方法只对那些圆形病毒，如葡萄扇叶病毒、苹果花叶病毒；或者线状病毒，如马铃薯X病毒、马铃薯Y病毒、康乃馨病毒有效；而对杆状病毒，如牛蒡斑驳病毒、千日红病毒无效。另外，该方法极易使植物材料受热枯死，造成损失。
高温处理有以下两种方法：
①温汤浸渍处理。适用于切下的休眠组织材料。方法是在50℃左右的温水中浸渍材料数分钟至数小时。如果水温达55℃左右，则会使大多数植物材料被杀死。该方法简便易行，但容易使材料受损伤。
②热风处理。适于生长组织。方法是将生长的盆栽植物材料在35～40℃的生长箱或室内处理数十分钟或长达数月，处理温度和时间因植物种类和器官的生理状况而异。然后切取处理后新长出的枝条作接穗。如康乃馨置于38℃温度下处理2个月、草莓在36℃中处理6周，均可去除病毒。马铃薯带病毒小苗在生长箱中进行变温处理，即35℃4 h，31℃4 h，如此交替处理1个月后，脱毒效果达80%，其中35℃处理使病毒钝化，31℃处理提高了小苗生活力，故而效果良好。
（2）低温处理
低温处理又称冷疗法，如菊花矮化病毒（CSV）和菊花褪绿斑驳病毒（CCMV）的植株经5℃处理4个月后，获得67%的去CSV无病毒苗、22%去CCMV无病毒苗；如处理时间加长为7.5个月，CSV去病毒苗达73%，CCMV达49%。可见，低温处理也有一定去病毒效果。
2）化学方法
植物脱病毒的化学方法是利用化学药品如嘌呤和嘧啶类似物、抗生素等处理，抑制植物体内病毒复制。常用的化学药品有孔雀绿、硫尿嘧啶、8-氮鸟嘌呤，这些化学物质在某些程度上可抑制病毒合成，但不能使病毒失活，且对寄主有毒害，故应少用。
3）生物方法
生物脱病毒方法是利用植物茎尖、珠心胚、愈伤组织等外植体进行培养去除病毒的方法。(https://www.daowen.com)
（1）茎尖培养
茎尖培养脱毒是最有效的脱毒方法。此法能与快速离体繁殖相结合，周期短，效率高。茎尖培养脱毒的原理是茎尖几乎不含病毒，采用旺盛分裂的茎尖组织培养，就有可能去除病毒。切取茎尖的大小与脱毒效果直接相关，茎尖越小，去病毒机会越大。不同植物及同一植物要脱去不同病毒所需茎尖大小也不相同，见表3.2。通常茎尖取材大小，与脱病毒效果成反比，与茎尖成活率成正比。茎尖越小，虽然病毒含量越低，但其营养、水分含量也低，培养时对培养基要求越高，剥离技术要求也越高。茎尖通常取材0.2～0.5 mm，带1～2个叶原茎，目前茎尖培养脱毒法已经成为植物无病苗生产中最广泛的一种方法。
表3.2 病毒在植物不同种类和品种茎尖分布的部位及脱毒效果
续表
（2）微体嫁接法
木本植物茎尖培养难以生根形成植株。为了克服这一困难，可采用微体嫁接法培养无病毒苗。该方法是20世纪70年代发展起来的，具体做法是将极小的茎尖（0.14～1.0 mm）作为接穗嫁接到不带病毒的种子实生苗砧木上，然后将砧木、接穗一起在培养基上培养。接穗在砧木上易成活，且去除病毒概率大，故有可能获得无病毒苗。应用微体嫁接技术，已获得苹果、柑橘、桃等木本植物无病毒苗。
（3）珠心组织培养法
柑橘类植物除合子胚外，还有多个珠心胚。珠心组织与维管束系统没有直接联系，故珠心组织培养可获得无病毒植株。例如，用该方法去除了柑橘银屑病、叶脉突出病、柑橘裂皮病、柑橘速衰病等病毒。该方法的缺点是会有20%～30%的变异率，同时无病毒苗苗期较长。
（4）愈伤组织法
脱毒植物各种器官和各部位组织经诱导可产生愈伤组织，再分化培养产生芽，最后长成小植株，其中有可能得到无病毒小苗。这一脱毒途径已在马铃薯、天竺葵、大蒜、草莓等植物上获得成功。
