5.2.2　预处理

5.2.2　预处理

对材料进行适当的预处理有利于花粉的诱导，常用的花粉预处理方法有低温处理、高温处理、药剂处理等。

1）低温处理

花药和花粉培养的主要预处理措施是低温处理。多项研究均表明，低温处理能明显提高花粉胚的诱导率。不同的材料采用的低温处理温度和时间有差异，见表5.1。如烟草花药低温处理适宜在7～9℃下处理7～14天，小麦、黑麦、杨属的花药在1～3℃处理2～20天均可得到良好的效果，如果在高于5℃下预处理，则不利于诱导。

表5.1　一些植物花药和花粉低温处理的温度和时间

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2）高温处理

在芸薹属植物上发现用较高的温度32℃培养游离小孢子3天后，再于25℃下进行正常的培养，能大幅度提高花粉胚的诱导率。1995年，Liu的实验证明游离小孢子对高温的预培养敏感期在培养期最初的24～48 h，更长的给予培养并非必需，而在正常培养48 h后再给予高温也不起作用。

3）药剂处理

相关研究发现，经过适当的药剂处理也对花粉培养有帮助。1993年，卫志明等提出，甘露醇给予培养对小麦游离小孢子培养有促进作用；1972年，Bennett等发现在减数分裂前用乙烯利喷施小麦植株能促使花粉细胞核分裂，将这些花药置于培养基上可得到多达18个核的花粉，在水稻上也有促进花粉形成愈伤组织的作用。

另外，将花粉经离心、激光照射等处理，也有促进花粉启动诱导的作用。