8.1.4　无血清培养基

因血清所含成分复杂，同时也含有一些不可控因素，细胞毒性物质和抑制物，不仅影响细胞生长和细胞某些功能的表达，有的还会对细胞产生去分化作用，影响一些基础研究的结果。因此，一些技术要求和研究目的较高的细胞培养，如细胞生长因子研究和制备、单克隆抗体制备、细胞分泌产物的研究和制备等，都须用无血清培养基，以减少或去除异种蛋白及干扰因素。不仅对产品纯化提取有益，而且可避免异种血清所引起的过敏反应。(https://www.daowen.com)

无血清培养基主要由基础培养基和替代血清的辅加成分组成。基础培养基一般用人工合成培养基，最常用的是HamF 12和DMEM按1∶1（体积比）混合，然后加入一定量的Hepes和NaHCO3作为基础溶液。辅加成分有：贴壁附着成分，如纤维粘连蛋白、层粘连蛋白胶原等。生长增殖成分，如一些生长因子和激素。酶抑制物，如大豆胰蛋白酶抑制剂。这些辅加成分根据细胞生长条件和实验要求添加。一般先配好储存液，过滤除菌，低温保存，要避免反复冻融。使用浓度和使用方法各不相同。如纤维粘连蛋白的配制浓度为25～50 mg／L，用时先涂在培养瓶皿支持物上；层粘连蛋白1～5 mg／L，可直接添加在培养液中。成纤维细胞生长因子配制浓度2 mg／L，使用浓度5μg／L，可直接添加入培养液中；大豆胰蛋白酶抑制剂，使用浓度为1～5 g／L，通常配制在基础培养液中。