第9章 动物细胞培养技术
▶▷学习目标
•掌握体外分离培养动物细胞的方法。
•掌握原代培养以及传代培养的特点及方法。
•掌握细胞克隆技术。
•掌握几种动物细胞大规模培养工艺的特点。
•了解动物细胞的超低温保存技术。(https://www.daowen.com)
▶▷能力目标
•掌握细胞原代分离培养技术(详见实训部分)。
•掌握细胞传代培养技术(详见实训部分)。
•掌握细胞的冻存与复苏技术(详见实训部分)。
动物细胞培养技术是指将动物组织或细胞从机体中取出,分散成单个细胞,模拟体内的生长环境,使其在体外继续生长与增殖的技术。该技术为相关基础研究提供了诸多的便利条件。例如,能排除神经体液因素的影响及肝、肾解毒功能的干扰,可观察某些因素或药物对培养细胞的直接作用。通过获得某一类型细胞的纯培养,可以使得该类细胞的培养实验基本不受其他类型细胞的干扰,为细胞的生理生化分析以及不同细胞之间相互作用的研究创造了条件。研究者可根据不同的研究内容和目的,十分方便地在细胞培养基中添加或减去某些特殊的物质,如激素或生长因子等,这样就可以确切地了解这些因子对细胞生长发育的效应及其生理生化本质。
在细胞培养实验中还可利用电子显微镜、同位素标记、放射免疫法和免疫组化法等方法来研究细胞形态结构及细胞内化学物质的分布,或直接观察培养细胞生命活动的动态过程。此外,包括从低等动物、高等动物到人类的各种细胞系和细胞株的建立——其中有正常细胞株、病毒或其他因子转化的细胞株、基因突变细胞株、杂交瘤细胞株等,已成为动物细胞生物学、发育生物学、遗传学、免疫学、肿瘤生物学、神经生物学等学科研究的重要模型。动物细胞培养技术不仅对生命科学领域的基础研究有重要的促进作用,而且也是大规模生产单克隆抗体、疫苗和某些基因工程药物等产品的关键技术,同时也为组织和器官培养以及转基因动物技术、克隆技术、干细胞技术等一系列技术的发展奠定了基础。