9.1.1　取材

取材是进行细胞培养的第一步，取材部位是否准确、所取材料是否保持活性、材料处理是否得当等都直接关系到体外培养的成败。因此在取材过程中，需要了解以下要求和注意事项：

①取材要注意新鲜和保鲜。新鲜组织易于培养成功，取材应尽量在4～6 h内能制作成细胞，并尽快放入培养箱内培养，若不能即时培养，应将组织浸泡于培养液内，于4℃存放。若组织块较大，应在清除表面血块、坏死组织、脂肪和结缔组织后，切碎于培养液内4℃存放，但时间不宜超过24 h。对于已切碎的组织或血液、淋巴组织应加入含10%二甲基亚砜（DMSO）的培养基，置于液氮中冷冻保存备用。

②取材应严格无菌。所取标本材料应在无菌条件下进行，若对所取材料疑有污染的可能，应将所取组织在含高浓度抗菌素（400 U／mL）甚至加入适量的两性霉素B或10%达克宁液的培养液内于4℃下存放2 h以上，再用PBS洗2～3次，以确保所取材料无菌。要用无菌包装的器皿或事先消毒好的带少许培养液的小瓶等便于携带的物品来盛放材料，所取材料应避免接触有毒有害的化学物质。

③取材和制作原代细胞时，要用锋利的器械，如手术刀或剃须刀片等切碎组织，尽可能减少对细胞的机械损伤。(https://www.daowen.com)

④要仔细去除所取材料上的血液（血块）、脂肪、坏死组织及结缔组织，切碎组织时应避免组织干燥，可在含少量培养液的器皿中进行。

⑤取材应注意组织类型、分化程度、年龄等，一般来讲，胚胎组织较成熟个体组织容易培养，分化低的较分化高的组织容易生长，肿瘤组织较正常组织容易培养。取材时应尽量选用易培养的组织进行培养。

⑥原代细胞取材时要同时留好组织学标本和电镜标本。对组织的来源、部位、包括供体的情况要做详细的记录，以备日后查询。