9.2.1　贴壁生长细胞传代

贴壁生长细胞传代必须采用消化法。根据细胞贴壁牢固程度的不同，可以选用不同浓度的胰蛋白酶液或螯合剂（EDTA）消化液，必要时还需联合使用胶原酶或其他酶消化液。(https://www.daowen.com)

贴壁生长细胞传代的具体方法：先吸去或倒掉旧培养液，用PBS或其他无钙离子、镁离子的BSS溶液轻缓漂洗培养物1～2次，尽量洗去残余血清；根据细胞贴壁的牢固程度，加入适当浓度的消化液轻轻摇动培养瓶，使贴壁的细胞游离；待细胞层略有松动，肉眼可观察到“薄膜”现象时，倒掉消化液，再继续作用2～3 min，轻轻摇动，细胞层可随残留的消化液呈片状从瓶壁上脱落下来，在显微镜下可发现细胞回缩变圆，细胞间隙增大；立即加入蛋白酶抑制剂或者血清培养液终止消化；离心，弃去上清液及混含其中的胰酶等；换入新鲜培养液，重新悬浮细胞，计数并调整细胞密度，根据要求按比率分别接种到新的培养容器中继续培养。