12.2.1　利用细胞体积和密度分离纯化法

根据细胞大小和密度的差异，可以采用等差速离心和密度梯度离心对细胞进行分离纯化。

差速离心是指在密度均一的介质中由低速到高速的逐级离心技术，用于分离不同大小的细胞或细胞器。由于某些细胞或细胞器在大小和密度上相互重叠，而且某些慢沉降颗粒常常被快沉降颗粒裹到沉淀块中，一般重复2～3次效果会好一些。但连续的离心不可避免地会损伤细胞，尤其是沉在管底的细胞。这一方法一般只用于分离大小悬殊的细胞，更多用于分离细胞器。通过差速离心可将细胞或细胞器初步分离，常需进一步通过密度梯度离心再进行分离纯化。(https://www.daowen.com)

密度梯度离心是指用一定的介质在离心管内形成一连续或不连续的密度梯度，将细胞混悬液或匀浆置于介质的顶部，通过离心力的作用使细胞分层、分离的离心技术。这类离心分离又可分为速度沉降和等密度沉降平衡两种。速度沉降主要用于分离密度相近而大小不等的细胞或细胞器，该法所采用的介质密度较低，介质的最大密度应小于被分离生物颗粒的最小密度，细胞或细胞器在十分平缓的密度梯度介质中按各自的沉降系数以不同的速度沉降而达到分离，适用于培养细胞的分离纯化。等密度沉降平衡适用于分离密度不等的细胞。细胞或细胞器在连续梯度的介质中经足够大的离心力和足够长时间则沉降或漂浮到与自身密度相等的介质处，并停留在那里达到平衡，从而可将不同密度的细胞或细胞器分离。这种方法适于分离细胞器，而不太适于分离和纯化细胞。