六 鉴定重组DNA所编码的蛋白质
到现在为止,我们已经筛选出捕捉了外源基因的真正转化体,但我们不能就此止步,我们还要检查外源基因在受体细胞中,即在陌生的新环境中能否表达其遗传特性。如前所述,所谓基因表达,就是基因先转录成传令官mRNA,再由mRNA翻译成相应蛋白质。既然一个基因决定一种蛋白质,那么受体细胞由于外源基因的引入,在蛋白质合成方面可能会出现如下变化:外源基因所编码的蛋白质增加;此蛋白质的存在可能会抑制或增强受体细胞原有的一种或数种蛋白质的合成;两种来源(给体和受体)的DNA的黏合可能会导致由双方共同编码的新蛋白质(所谓的融合蛋白质)的合成;受体DNA由于外源DNA的插入可能会丧失原来的某些蛋白质。如果出现上述一种或几种情况,都说明外源基因已经在受体细胞中得到表达。细胞合成的蛋白质的种类,也如DNA一样,靠电泳来确定,但此时的电泳介质不是琼脂糖而是聚丙烯酰胺,蛋白质因分子大小以及所携带的电荷不同,迁移速度各异,借此可以将各种蛋白质分开。