2.5.1 S1核酸酶

2.5.1 S1核酸酶

S1核酸酶是从半曲霉菌(Aspergillus oryzae)中分离得到的,是一种含锌的蛋白质,相对分子质量为32000,相对耐热。

S1核酸酶是一种单链特异的核酸内切酶,在高离子强度(0.1~0.4 mol/L NaCl)、低Zn2+浓度(1 mmol/L)和酸性(最适pH值为4.0~4.5)条件下,可以降解单链DNA和RNA,产生含5'-P的单核苷酸或寡核苷酸,又称单链特异的核酸酶。但是调节酶的浓度,也可能降解双链DNA的单链缺口。对于双链DNA、双链RNA以及DNA-RNA杂合链的作用相对较低,通常水解单链DNA的速度要比水解双链DNA的速度快75000倍。S1核酸酶的活性如图2-20所示。

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图2-20 S1核酸酶的活性

(引自Brown,1990)

由于具有以上特性,S1核酸酶可以切除双链DNA突出的单链末端,从而产生平末端,可以切除cDNA中单链发夹结构,生成无发夹结构的cDNA,可用于分析DNA-RNA杂交体的结构,确定真核基因组中内含子的位置等。