11.4.1　锌指核酸酶技术

锌指核酸酶技术（ZFN技术）作为第一代的基因编辑技术，是基于ZFN介导的特异基因组编辑。与传统的基因打靶技术不同，它不依赖于同源重组的高效率基因打靶技术，并且不受胚胎干细胞的限制。ZFN主要由锌指蛋白结构域和非特异性的核酸内切酶FokⅠ的切割结构域组成。锌指蛋白结构域中的DNA结合域特异性识别并结合靶基因位点。FokⅠ的催化结构域具有核酸内切酶活性，能够非特异性地切断基因组DNA。通过人工设计锌指表达文库，可使不同的ZFN结合在不同的特定DNA位点，在催化结构域的作用下，可实现特定DNA位点的切割，然后启动细胞内的修复机制，达到基因突变的目的。目前，ZFN技术已经成功地在大鼠、小鼠、斑马鱼、果蝇、家蚕、拟南芥、烟草、玉米等多种生物上得到广泛应用。