原代培养和传代培养

原代培养（primary culture）是指从新鲜的生物供体中分离出组织或细胞后的第一次体外培养，是建立各种细胞系的第一步。原代培养持续1～4周。由于原代培养使用的细胞刚刚离开活体，其特征与供体细胞在各方面相似，适用于药物检测、细胞分化等实验。

当原代培养的细胞增殖到一定数量时，为避免因生存空间不足或密度过大而导致细胞营养不足影响其生长，须及时对细胞进行分离、稀释和分瓶培养。将原代培养的细胞从原培养瓶中分离出来，用培养基稀释后接种到新的培养瓶中进行培养，称为细胞传代（cell subculture）。从接种到下一代的时间称为一代。在一代细胞培养中，通常会发生2～6次细胞分裂。哺乳动物细胞平均经过10～50次细胞分裂后，增殖速度逐渐减慢，细胞进入衰退期，最终自然死亡。(https://www.daowen.com)

不同类型的细胞需要采取不同的传代方法。贴壁细胞须用消化剂（通常为0.25%胰酶溶液或0.02%EDTA溶液）将其相互分离，再从培养容器表面分离，然后离心，加入新培养基，稀释，接种细胞。悬浮细胞的传代过程比较简单直接，吹打或离心后即可传代。由于传代过程涉及多个实验操作步骤，细胞被污染的可能性大大增加，因此必须严格执行无菌操作。