细胞培养条件

细胞培养要求无菌操作，避免微生物及其他有害因素的影响，一般须在细胞培养间的特殊环境中进行。常规的细胞培养实验需要开展清洗、消毒、储藏、无菌操作、制备及孵育等方面的工作，需要准备室和无菌室。准备室主要用于从事清洗消毒、制备蒸馏水、配制培养基等培养细胞的准备工作，应该配备用于清洗各种器皿和器械的水池、浸泡各种玻璃器皿和器械的酸缸、压力蒸汽消毒器、水纯化装置、烘干培养器皿及器械的干燥恒温箱等设备。无菌室包括操作间及缓冲间。操作间的主要设备包括供无菌操作使用的超净工作台、观察培养细胞的倒置性显微镜、复苏细胞及预热培养基的水浴锅、离心细胞所需的小型离心机、4℃冰箱、CO2培养箱等。缓冲间的主要设备包括用于冻存和贮存细胞的液氮罐、CO2钢瓶和存放已消毒物品的储藏柜等。细胞培养必须在无菌条件下进行，对操作环境也有严格的要求，整个培养室及相关设备必须定期消毒灭菌，否则细胞一旦被污染，很容易生长不良甚至死亡。(https://www.daowen.com)

培养细胞所需要的氧气和二氧化碳由细胞培养箱和CO2钢瓶提供，营养物质来自培养基，细胞代谢生成的废物通过适时更换培养基进行清除。目前常用的基础培养基有MEM、RPMI1640、DMEM及F12培养基等，这些培养基含有细胞生长所需的氨基酸、维生素和微量元素等营养物质，成分均已知和固定，可以用于简单的细胞培养。许多细胞的培养还需要加入一些天然生物成分，如血清、生长因子（growth factor，GF）、动物组织提取液等。