细胞冻存和复苏技术

细胞在体外培养时，随着传代次数的增加，它们的各种生物特性容易发生变化，因此可以将培养的细胞冷冻保存在-196℃的液氮中，需要时将细胞复苏后再做培养和实验研究。冻存时应选择处于生长状态良好、对数生长期的细胞。细胞如果直接进行冻存，细胞内外的水分会迅速形成冰晶，使细胞发生机械损伤、电解质紊乱、蛋白质变性等不利变化。因此，冻存细胞时常向培养基中加入适量的甘油或二甲基亚砜（DMSO）等冷冻保护剂。冷冻保护剂的使用，再配合缓慢冷冻的方法，可以使细胞内的水分逐渐渗出细胞外，避免冰晶在细胞内大量形成。(https://www.daowen.com)

当细胞需要复苏时，将冷冻的细胞从液氮中取出并溶解，以恢复它们的活力。快速融化法可保证胞外结晶在短时间内融化，避免因融化缓慢而使水渗入细胞、重新结晶。成功复苏的细胞仍可以保持活力，可以接种再培养或在体外运输。