6.1.3　膀胱类器官的鉴定

为检测体外构建的膀胱类器官能否较好地模拟体内组织结构、保留体内组织的相关特征，需要使用多种方法对构建的类器官进行各方面鉴定。

从组织结构与细胞类型角度上可以使用苏木素-伊红染色、免疫组织化学染色、免疫荧光染色等方法，鉴定类器官的整体结构是否和与之对应的正常或肿瘤组织相同，是否能反映目标组织的主要结构特征。同时，通过对不同细胞标志物的染色，能够判断类器官的不同类型细胞的构成、比例、空间位置关系等。如在鼠膀胱类器官的鉴定中，可通过免疫组织化学染色的方法对Ck5等基底细胞（basal cell）的细胞标志物、p63等中间细胞（intermediate cell）的细胞标志物，以及Ck20和UpkⅢ等上基部/伞状细胞（suprabasal/umbrella）的细胞标志物进行染色确定膀胱类器官的细胞组成，判断所构建的类器官是否含有上述重要细胞类型，以及不同类型细胞的排列分布是否与生理状态接近。(https://www.daowen.com)

成功的类器官不仅需要符合对应组织的组织学特征，尤其在肿瘤类器官中，还需要保持对应肿瘤组织的基因图谱特征。针对这一点可以运用实时荧光定量PCR、RNA测序、基因组测序、靶向重测序、蛋白免疫印迹实验等对类器官进行鉴定。对类器官与其对应组织进行基因组测序能够鉴定类器官的基因突变特征是否与来源组织相近，也可以鉴定类器官能否保留重要的基因突变。靶向重测序则更具针对性，可将一组基因或部分基因组区域分离出来并对其进行测序，对于类器官鉴定来说，可以对选定的基因集，如已知致病基因或研究者通过不同方法筛选得到的基因进行测序，以更精准地判断原位组织中重要的基因突变特征是否被类器官保留。