6.3.2　前列腺类器官的构建

前列腺的细胞种类相对简单，对于前列腺类器官的关注主要集中在上皮细胞。同时，因为前列腺相关疾病在男性中相对高发的态势，前列腺疾病类器官构建，尤其是前列腺癌的类器官构建，也是领域内值得关注的内容。前列腺类器官的构建思路目前已较为成熟。不论是从健康细胞还是从癌细胞出发进行前列腺类器官的构建，其成功率也越来越高。Hans Clevers等［91］曾系统阐述了从健康小鼠和人前列腺细胞（消化或流式细胞术分选的单个管腔或基底细胞）、转移性前列腺癌病变和循环肿瘤细胞为起始进行3D前列腺类器官培养的策略。从健康小鼠或人前列腺培养的类器官，既含有分化的管腔细胞，也含有分化的基底细胞；而来自前列腺癌组织的类器官则能够反映前列腺肿瘤的一些特点。

1.正常前列腺类器官的构建

鼠正常前列腺和人正常前列腺构建方式比较相似。对于鼠前列腺来讲，倘若要构建成类器官，需要将前列腺以外的部分去掉后，将前列腺切成小块，利用胶原酶和胰酶消化成单细胞，将细胞种于基质胶上。鼠前列腺类器官的因子需要包含EGF、Noggin、Rspondin 1等，而人前列腺类器官除此之外还需要添加FGF10、FGF2、Prostaglandin E2等。这些因子有些为类器官生长所必需，有些则是为了提高类器官的生长效率。值得注意的是，在传代过程中，在培养前7天需使用含有细胞凋亡抑制剂Y-27632的培养基，后续传代则不必添加细胞凋亡抑制剂。(https://www.daowen.com)

2.前列腺癌类器官的构建

前列腺癌类器官的构建方式同正常前列腺类器官的构建方式类似。进行前列腺癌类器官的构建时，同样需要对组织进行消化，然后将细胞种于基质胶上。值得一提的是，从循环系统中分离出前列腺癌细胞并养成类器官的方法也被建立起来。在进行类器官诱导前，需要利用化学试剂和密度梯度离心等方法去掉血液中的血细胞。同时，在更换培养基和传代过程中需要维持细胞凋亡抑制剂Y-27632的浓度。