2 实验结果
2 实验结果
2.1 大鼠热应激后一般情况观察
大鼠热应激后即刻神态自然,嘴鼻湿润,眼睛有神,动作相对迟缓; 恢复24h后发现眼睛有神,活泼好动,皮毛光亮,动作迅速,与对照组无任何不同。
2.2 热应激大鼠和正常大鼠完成离心运动负荷的情况
试验发现热应激大鼠恢复24h后在从事离心运动时比正常大鼠完成的好,均能够完成60min的大强度离心运动,均未出现力竭; 而相对应的正常大鼠有3只出现了力竭。
2.3 热应激不运动组大鼠腓肠肌细胞HSP70、αB-crystallin蛋白表达的变化
热应激对腓肠肌细胞HSP70、αB-crystallin蛋白表达的影响结果见表5和图5、图6。蛋白条带用OD (optical density) 值量化。对照组OD值平均数作为基数,其他组OD值除以基数,乘以100%作为蛋白变化的结果[1]。结果发现热应激明显的使腓肠肌细胞中的HSP70、αB-crystallin表达增加。其中HSP70在预热应激后即刻表达增加128%,应激后24h表达增加到273%; αB-crystallin在热应激后即刻表达增加340%,应激后24h增加到238%。
表5 热应激对腓肠肌细胞HSP70、αB-crystallin蛋白表达的影响 单位:%
图5 热应激后腓肠肌HSP70和a B-crystallin蛋白表达的Western-Blotting印记结果
C1至C4为对照组、H0为热应激后即刻组、H24为热应激后24h组
图6 热应激后腓肠肌HSP70、a B-crystallin蛋白表达结果.* 表示与对照组有显著性差异 (P<0.05)
2.4 热应激不运动组大鼠血清生化指标的变化
热应激不运动组大鼠血清生化指标的变化见表6。
表6 热应激不运动组 (离心运动前1h) 大鼠血清生化指标变化结果
2.5 预热应激对离心运动后腓肠肌最大强直收缩力变化的影响
2.5.1 各组大鼠体重和腓肠肌横断面积
表7给出了各实验组大鼠体重和腓肠肌横断面积,从表中可以看到E0和HE1组体重偏小些,但是各组体重与对照组相比没有显著性差异。各组大鼠腓肠肌横断面积的值没有显著性差异。
表7 各组大鼠体重和腓肠肌横断面积
续表
2.5.1 腓肠肌最大强直收缩力及收缩应力变化结果
表8和图7给出了各组腓肠肌最大强直收缩力及相应的收缩应力的结果。正常大鼠在离心运动后0h、24h、48h的最大强直收缩力下降较多,与对照组相比有显著性差异 (P<0.05),其中0h组下降最多,下降了44.21%,24h时开始恢复,至48h时又有所下降。预热应激组除运动后即刻0h组最大强直收缩力下降较多 (下降23.24%) 外,在24h和48h收缩力的值开始恢复并且与正常对照组没有显著差异,48h收缩力已基本恢复到正常对照组的水平。
腓肠肌横截面单位面积最大强直收缩力 (收缩应力) 的值变化趋势与最大强直收缩力一致。E0组和E2组下降较多,除与对照组有显著性差异外与HE1组和HE2组均有显著性差异P<0.05。
表8 腓肠肌最大强直收缩力和收缩应力变化
续表
注: * 与正常对照组C组有显著性差异P<0.05; #与E0组有显著性差异P<0.05; &与HE2组有显著性差异P<0.05; $与HE1组有显著差异P<0.05。
图7 腓肠肌最大强直收缩力变化结果
* 表示与正常对照C组有显著性差异P<0.05
2.6 离心运动后血清肌酸激酶CK和乳酸脱氢酶LDH变化
用血清CK、LDH指标综合反映骨骼损伤的程度,测试结果见表9、图8、图9。
血清CK,无论是正常离心运动组,还是预热应激离心运动组都在离心运动后即刻最高,在24h和48h两组变化基本一致。经ANOVA分析表明: 两组都在运动后即刻与其他各组达到显著性差异P<0.05。但是预热应激离心运动即刻HE0组显著比常温离心运动即刻E0组低,二者有显著性差异P<0.05。
血清LDH的变化趋势与 CK 表现出相似的变化特征。ANOVA分析表明: 正常大鼠离心运动后即刻E0组显著高于E1、E2和HE2组,P<0.05。HE0组的值虽然较大,但是与其他各组没有显著性差异。
表9 离心运动后血清CK、LDH变化结果
注: *表示与E0组有显著性差异P<0.05; #表示与HE0组有显著性差异P<0.05。
图8 各组离心运动后血清CK变化结果
图9 各组离心运动后血清LDH变化结果
2.7 离心运动后超氧化物歧化酶 (SOD)、丙二醛 (MDA)变化
离心运动后超氧化物歧化酶 (SOD)、丙二醛 (MDA) 变化见表10、图10、图11。
表10 SOD和MDA变化结果 n=6
注: #与C有显著性差异(P<0.05); &与E0有显著性差异(P<0.05);*与E1有显著性差异(P<0.05); @与E2有显著性差异(P<0.05)
图10 肌组织SOD (m SOD)、血清SOD (b SOD) 变化
图11 肌组织MDA (m MDA)、血清MDA (b MDA) 变化
用超氧化物歧化酶 (SOD) 和丙二醛 (MDA) 分别代表机体抗氧化能力和自由基代谢情况。从表10和图10、图11发现,热应激大鼠离心运动后肌组织SOD (m SOD) 比对照组和正常离心运动大鼠m SOD高,其中HE0组和HE2组与对照组相比有显著差异(P<0.05),与E1组相比也有显著性差异 (P<0.05)。血清SOD (b SOD) 变化趋势与肌组织SOD变化趋势相似,热应激运动组大鼠SOD值均比对照组和正常大鼠离心运动后的值高,其中HE1组和HE2组b SOD显著高于对照组和E1组(P<0.05)。
肌组织MDA (m MDA) 值,热应激运动组和常温运动组与对照组相比均有升高的趋势,但与对照组相比没有显著性差异,且热应激运动组和常温运动组相比也没有显著性差异。血清MDA值变化与肌组织MDA值不同,热应激大鼠运动后MDA值显著低于对照组的MDA值 (P<0.05),也显著低于正常大鼠离心运动后48h (E2) 的MDA值,而且热应激大鼠离心运动后24h组MDA值最低,显著低于对照组和正常大鼠离心运动后各组MDA的值 (P<0.05)。
[1]Timothy J and J Escobedo. Cytoskeletal disruption and small heat shock protein translocation immediately after lengthening contractions. Am J Physiol Cell Physiol. 2004, 286: C713~C722.