平板凝集试验技术
颗粒性抗原（细菌等大抗原）与相应的抗体混合后，在电解质的参与下，经过一定时间，抗原抗体凝集成肉眼可见的凝集块，这种现象称为凝集反应。
凝集反应分为直接凝集反应和间接凝集反应，直接凝集反应又可分为平板凝集与试管凝集。据《动物防疫法》的有关规定，奶牛羊每年均要进行布鲁氏菌的检测，常用玻板凝集反应进行初检，故以布鲁氏菌玻板凝集反应为例，介绍平板凝集试验技术。
1.材料与试剂
（1）抗原 本法所用抗原由指定单位提供，按说明书使用。本抗原为浅蓝色的悬浮液。使用前充分振荡，并使其温度达到20℃左右。
（2）被检血清 被检血清必须新鲜，无明显蛋白凝固，无溶血现象和无腐败气味。加入防腐剂的血清自采血之日算起，最迟于15天内检验。试验前须置于温室中，使其温度达到20℃左右。
（3）阳性血清 由指定单位提供。通常取自人工免疫的家畜，但也可从送检血清中选取。凝集价最好不低于1∶800。
（4）阴性血清 由指定单位提供。
（5）器具 包括移液器、玻璃板、玻璃记号笔、生理盐水、酒精灯、牙签或火柴棒等。
2.操作方法与步骤
1）取洁净玻璃板1块，用玻璃记号笔画成4毫米2小格，每列5格。
2）用移液器按下表先后加血清、抗原、生理盐水、阳性血清、阴性血清（表1-2）。
表1-2 布鲁氏菌平板凝集试验术式表(https://www.daowen.com)
3）用牙签自血清量少的格开始依次向前搅拌混合；每格血清用1根牙签；用过的牙签要放在固定容器内，工作完毕后，集中烧毁。
4）混合完毕后，放于酒精灯上稍加温，使之均匀达30℃左右，静置3～4分钟，再拿起玻璃板轻轻转动，于5～8分钟内判定结果。
5）结果判定与反应强度记录：
++++：出现大的凝集块或小的颗粒，液体完全透明，即为100%菌体凝集。
+++：有明显的凝块，液体几乎完全透明，即为75%菌体凝集。
++：有可见的凝块，液体不太透明，即为50%菌体凝集。
+：仅仅可以看出颗粒物，液体浑浊，即为25%菌体凝集。
-：液体均匀浑浊，无凝集现象。
3.试验结果的判定标准
牛、马和骆驼的血清20微升，凝集呈“++”以上时，判定为阳性；40微升凝集呈“++”以上时，判为可疑。羊、猪血清40微升，凝集呈“++”以上时，判定为阳性；80微升凝集呈“++”以上时，判为可疑；判为可疑反应的，经3～4周，须重新采血、检验。如果重检时仍为可疑，则判定为阳性。
